[发明专利]糖基化改造提高脂肪酶表达的方法、突变酶及其应用有效
申请号: | 201510195799.9 | 申请日: | 2015-04-22 |
公开(公告)号: | CN104762277B | 公开(公告)日: | 2017-07-14 |
发明(设计)人: | 喻晓蔚;徐岩 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N9/20 | 分类号: | C12N9/20;C12N15/81;C12N1/19;C12R1/845;C12R1/84 |
代理公司: | 北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙)11419 | 代理人: | 张勇 |
地址: | 214122 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了糖基化改造提高脂肪酶表达的方法、突变酶及其应用,属于酶工程领域。本发明是将米根霉脂肪酶的前导肽序列进行N‑糖基化突变,将SAS和/或NT氨基酸分别改造为N‑糖基化位点NGT和/或NLT,得到的突变体酶proROLA、proROLB、proROLAB的胞外蛋白浓度分别比未进行糖基化的proROL提高了211%、188%、233%,发酵罐培养时酶活分别达到8210U·mL‑1、8457U·mL‑1和9366U·mL‑1,而未突变的proROL的胞外酶活几乎为零。本发明的米根霉脂肪酶具有显著提高的脂肪酶酶活,可以应用于食品、化工及生物能源等领域。 | ||
搜索关键词: | 糖基化 改造 提高 脂肪酶 表达 方法 突变 及其 应用 | ||
【主权项】:
一种脂肪酶突变体,其特征在于,所述突变体是在米根霉脂肪酶的基础上,将其前导肽的SAS和/或NT氨基酸位点突变为N‑糖基化位点;所述突变体是以下任意一种:氨基酸序列是SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示的序列。
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