[发明专利]一种快速检测鲜乳中沙门氏菌的方法有效
申请号: | 201510195909.1 | 申请日: | 2015-04-23 |
公开(公告)号: | CN104726534B | 公开(公告)日: | 2017-04-19 |
发明(设计)人: | 王法云;朱海华;王雪竹;尹红娜;周莉;章建军;谭静;平洋;王永;王慧 | 申请(专利权)人: | 河南省商业科学研究所有限责任公司 |
主分类号: | C12Q1/10 | 分类号: | C12Q1/10;G01N33/569;C12R1/42 |
代理公司: | 郑州立格知识产权代理有限公司41126 | 代理人: | 涂连梅 |
地址: | 450002*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | 一种快速检测鲜乳中沙门氏菌的方法,属于微生物检测技术领域,包括以下步骤将鲜乳样品加入到缓冲液中得到鲜乳混合液,所述缓冲液中含有去除蛋白质和脂肪的试剂;对鲜乳混合液进行滤纸过滤,取滤液进行微孔滤膜抽滤;将过滤后的微孔滤膜剪碎,添加四硫磺酸钠煌绿增菌液和磷酸盐缓冲液进行冲洗浸泡,得到菌悬液;向菌悬液中添加沙门氏菌免疫磁珠进行混合,振荡、静置磁力架上分层,弃上清;取下层溶液,加入磷酸盐缓冲液洗涤,静置磁力架上分层,弃上清,得到浓缩待测液;采用Elisa检测法进行检测即可。本发明方法检测鲜乳中沙门氏菌的时间总共约为50min,与国标方法相比,检测时间大大缩短。 | ||
搜索关键词: | 一种 快速 检测 乳中 沙门氏菌 方法 | ||
【主权项】:
一种快速检测鲜乳中沙门氏菌的方法,其特征在于,包括以下步骤:1)将鲜乳样品加入到缓冲液中得到鲜乳混合液,所述缓冲液中含有去除蛋白质和脂肪的试剂;2)对鲜乳混合液进行滤纸过滤,取滤液进行微孔滤膜抽滤;3)将步骤2)中过滤后的微孔滤膜剪碎,添加四硫磺酸钠煌绿增菌液和磷酸盐缓冲液进行冲洗浸泡,得到菌悬液;4)向菌悬液中添加沙门氏菌免疫磁珠进行混合,振荡、静置磁力架上分层,弃上清;5)取下层溶液,加入磷酸盐缓冲液洗涤,静置磁力架上分层,弃上清,得到浓缩待测液;6)采用Elisa检测法进行检测即可;步骤2)中对鲜乳混合液进行滤纸过滤后,取滤液进行离心,收集下清液,微孔滤膜抽滤;所述微孔滤膜孔径为0.22μm;步骤1)中所述试剂为纤维素树脂;步骤1)中所述缓冲液为0.01mol/L磷酸盐缓冲液;步骤3)中所述冲洗浸泡时间≤2min,所述四硫磺酸钠煌绿增菌液和磷酸盐缓冲液体积比为1:1。
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