[发明专利]一种电化学发光传感器及其免疫分析方法

摘要

本发明公开了一种电化学发光传感器及其免疫分析方法，本发明的一种电化学发光传感器的制备方法，包括以下步骤：(1)将石英玻璃片在HCL与H2O2的水溶液中浸泡，在1％的3-(2,3环氧丙氧)丙基三甲氧基硅烷GPTMS的甲苯溶液中进行硅烷化反应；(2)用二甲苯和乙醇冲洗并在氩气气氛下吹干；(3)将含有(十二烷基磺酸钠)的金纳米粒子溶液和5.0wt％聚葡萄糖胺(1-4)-2-氨基-B-D葡萄糖溶液混合，与化学发光探针、抗体溶液相混合；(4)将其滴涂到石英玻璃片表面；(5)用磷酸盐缓冲液和烷基酚聚氧乙烯醚冲洗，制得电化学发光免疫传感器。本发明检测时间短便捷地无标记检测的电化学发光传感器及其免疫分析方法。

主权项

一种电化学发光传感器的制备方法，其特征在于包括以下步骤：(1)将石英玻璃片在HCL与H₂O₂的水溶液中浸泡10‑12h，用蒸馏水充分清洗后，在氩气气氛中吹干，浸泡在1％的3‑(2,3环氧丙氧)丙基三甲氧基硅烷GPTMS的甲苯溶液中进行硅烷化反应，在温度为22℃下放置20‑24h；所述HCL与H2O2的体积比为8:4；(2)用二甲苯和乙醇冲洗并在氩气气氛下吹干；(3)将含有(十二烷基磺酸钠)的金纳米粒子溶液和5.0wt％聚葡萄糖胺(1‑4)‑2‑氨基‑B‑D葡萄糖溶液混合后超声至完全分散，然后与化学发光探针、抗体溶液相混合；(4)取上述混合溶液，将其滴涂到石英玻璃片表面，并在温度为22℃下反应2‑3h，然后在10℃下放置10‑12h；化学发光探针为葡萄糖氧化酶或辣根过氧化物酶；所述抗体溶液为人类免疫球蛋白HIgG抗体溶液或甲胎蛋白AFP抗体溶液；所述葡萄糖氧化酶或辣根过氧化物酶的浓度为6μg/ml，人类免疫球蛋白HIgG抗体溶液浓度为50μg/ml；(5)用磷酸盐缓冲液和烷基酚聚氧乙烯醚冲洗五次，并在10℃下用封闭液封闭15‑20h，所述封闭液为含1％牛血清白蛋白的0.01M磷酸盐缓冲液，pH为7.3；制得电化学发光免疫传感器。