[发明专利]诺西肽生物合成控蛋白NosP的特异性结合序列及相关应用在审
| 申请号： | 201510198244.X | 申请日： | 2015-04-23 |
| 公开（公告）号： | CN104762304A | 公开（公告）日： | 2015-07-08 |
| 发明（设计）人： | 陈依军;张红;吴旭日 | 申请（专利权）人： | 中国药科大学 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/00;C12P21/02 |
| 代理公司： | 南京知识律师事务所 32207 | 代理人： | 张铂 |
| 地址： | 211198 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了诺西肽生物合成调控蛋白NosP的特异性结合序列及其对诺西肽生物合成效价的影响。具体包括以下内容：构建含有特异性亲和纯化标签和截短nosP基因的重组表达质粒，并在大肠杆菌异源表达和亲和层析法制备NosP蛋白纯品。利用EMSA和DNase Ⅰ footprinting assay技术寻找活跃链霉菌诺西肽生物合成基因簇中的NosP特异性结合序列并验证。在此基础之上，通过诺西肽生物合成途径改造，使诺西肽生物合成效价提高150％，应用前景广阔。 | ||
| 搜索关键词： | 诺西肽 生物 合成 蛋白 nosp 特异性 结合 序列 相关 应用 | ||
【主权项】：
诺西肽生物合成调控蛋白NosP的特异性结合序列，其特征在于采用如下方法制备得到，方法包括以下步骤：(1)构建含有nosP基因及相关纯化标签的重组表达质粒并导入大肠杆菌内，异源表达NosP蛋白，并采用亲和层析的方法纯化制备可用于EMSA和DNase Ⅰ footprinting assay的高纯度NosP蛋白；(2)通过EMSA和DNase Ⅰfootprinting assay技术寻找活跃链霉菌诺西肽生物合成基因簇中的NosP特异性结合序列并实验验证。
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