[发明专利]浙江金线兰种苗的快速繁殖方法

摘要

本发明涉及一种浙江金线兰种苗的快速繁殖方法，它能有效提高浙江金线兰的繁殖效率，防止试管苗出现徒长和玻璃化现象，从而获得大量浙江金线兰种苗，为其规模化生产应用奠定基础。所述方法包括外植体的准备阶段、初代诱导培养阶段、继代培养阶段、生根培养阶段和移栽种植阶段；初代诱导培养基和继代增殖培养基均由以下组分配比组成MS+0.1‑0.5mg/L TDZ+0.5‑0.8mg/L6‑BA+0.18‑0.25mg/L NAA+50‑100g/L土豆泥+0.2‑0.6mg/L活性炭；生根培养基由以下组分配比组成MS+0.6‑1.5mg/L NAA+50‑100g/L香蕉泥+0.4‑1.0mg/L活性炭。

主权项

一种浙江金线兰种苗的快速繁殖方法，其特征在于：所述的方法包括以下依序进行的步骤：(1)外植体的准备阶段采集浙江金线兰植株，遮荫培养15‑30天；从其中选择开始恢复生长的植株，剪取地上部份的茎节，除去叶片，作为外植体；在超净工作台上，采用质量百分比浓度为9‑11％的次氯酸钠溶液对所述外植体消毒8‑15分钟，无菌水冲洗干净，沥干水分备用；(2)初代诱导培养阶段在无菌条件下，将步骤(1)中无菌处理好的外植体切成带一个茎节的茎段，所述茎段长度为0.4‑1.2cm，将所述茎段插入初代诱导培养基中进行初代诱导培养，培养周期为40‑70天，培养条件为光照1000‑1500Lx的日光灯光照，光照周期为8‑10h/d，培养温度为23±2℃，培养环境湿度为40‑50％；(3)继代培养阶段将步骤(2)中初代诱导培养获得的带有萌发的腋芽或顶芽的外植体切成带一个腋芽或顶芽的茎段，所述茎段长度为0.4‑1.2cm，将所述茎段插入继代增殖培养基中进行至少一次继代培养，每次继代培养的培养周期为90‑100天；(4)生根培养阶段将步骤(3)中每次继代培养获得的小苗，转移接种到生根培养基中培养，培养周期为90‑120天；(5)移栽种植阶段将步骤(4)中生根培养后获得的种苗，转移至温室大棚内炼苗10‑30天，炼苗后将种苗取出洗净，种植在栽培基质中，置于生态林下或可控温湿度的设施大棚内，栽培环境温度15‑32℃，栽培湿度为60‑90％，光照度为4000‑7000Lx，栽培周期为120‑180天；所述栽培基质为草炭土和分化黄壤土以2.0‑2.5︰1的体积比例混合的混合物；所述步骤(2)中的初代诱导培养基和步骤(3)中的继代增殖培养基均由以下组分按照以下配比组成：MS+0.1‑0.5mg/L TDZ(噻苯隆)+0.5‑0.8mg/L6‑BA+0.18‑0.25mg/L NAA+50‑100g/L土豆泥+0.2‑0.6mg/L活性炭，培养基的pH值为5.34‑5.60；所述步骤(4)中的生根培养基由以下组分按照以下配比组成：MS+0.6‑1.5mg/L NAA+50‑100g/L香蕉泥+0.4‑1.0mg/L活性炭，培养基的pH值 为5.34‑5.60；所述步骤(3)和步骤(4)中的培养条件为光照2000‑3000Lx的日光灯光照，光照周期为10‑12h/d，培养温度为23±2℃，培养环境湿度为40‑50％。