[发明专利]马立克氏病病毒弱毒疫苗814株的反向遗传操作系统及其在病毒拯救中的应用在审
申请号: | 201510200990.8 | 申请日: | 2015-04-24 |
公开(公告)号: | CN104830883A | 公开(公告)日: | 2015-08-12 |
发明(设计)人: | 李凯;刘长军;王笑梅;张艳萍;高玉龙;崔红玉;高立 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 |
主分类号: | C12N15/63 | 分类号: | C12N15/63;C12N7/01;C12R1/93 |
代理公司: | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 | 代理人: | 孙皓晨 |
地址: | 150001 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | 本发明公开了一种马立克氏病病毒弱毒疫苗814株的反向遗传操作系统及其在病毒拯救中的应用。本发明通过将马立克氏病病毒弱毒疫苗814株的基因组剪切后分段克隆入Fosmid粘粒载体pCC1Fos,构建了814疫苗株基因组Fosmid文库。在对该文库进行基因组测序的基础上,从中挑选出5个克隆有814疫苗株基因组片段,且相互含有重叠区域,并可以拼接覆盖814株全基因组的重组粘粒。用这5个粘粒共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),成功拯救出与原MDV疫苗株生物学特性相同的病毒。应用本发明建立的反向遗传操作系统,一是可以拯救出该弱毒疫苗株,作为疫苗用于MDV的预防;更重要的是,利用该反向遗传操作系统可以实现在细菌中进行病毒改造,从而用于MDV活载体疫苗的研制。 | ||
搜索关键词: | 马立克氏病 病毒 疫苗 814 反向 遗传 操作系统 及其 拯救 中的 应用 | ||
【主权项】:
一种马立克氏病病毒弱毒疫苗814株的反向遗传操作系统,其特征在于所述系统包含5个分别依次含有马立克氏病病毒弱毒疫苗814株基因组1‑47873位、40028‑79118位、72447‑113806位、106337‑139612位和129115‑172541位核苷酸序列的重组粘粒,其中所述的马立克氏病病毒弱毒疫苗814株全基因组序列的GeneBank登录号为JF742597。
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