[发明专利]一种贝类总病毒核酸的制备方法在审

专利信息
申请号: 201510201269.0 申请日: 2015-04-23
公开(公告)号: CN104946624A 公开(公告)日: 2015-09-30
发明(设计)人: 姜敬哲;黄晟;何健;王江勇 申请(专利权)人: 中国水产科学研究院南海水产研究所
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10;C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/93
代理公司: 广州知友专利商标代理有限公司 44104 代理人: 宣国华;马赟斋
地址: 510300 广东*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明公开了一种贝类总病毒核酸的制备方法,包括以下步骤:(1)磨粉:在液氮环境下,将贝类组织样品磨成粉;(2)匀浆:贝类组织样品粉末中加入PBS缓冲液,然后匀浆成浆料;(3)获得总病毒粗提物:浆料经离心处理,所得的上清液经滤膜过滤后离心处理,弃上清液,所得的沉淀即为总病毒粗提物;(4)提取核酸:所述总病毒粗提物加入核酸酶溶液,制成悬浮液,于37℃摇床处理25-40min,而后提取总病毒核酸;(5)核酸扩增:对所述总病毒核酸进行扩增,以提高核酸浓度,有利于高通量测序。该方法操作简单,获得贝类总病毒核酸纯度高,且核酸完整,核酸浓度满足高通量测序的要求。
搜索关键词: 一种 贝类 病毒 核酸 制备 方法
【主权项】:
一种贝类总病毒核酸的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)磨粉:在液氮环境下,将贝类组织样品磨成粉;(2)匀浆:贝类组织样品粉末中加入PBS缓冲液,然后匀浆成浆料;(3)获得总病毒粗提物:浆料经离心处理,所得的上清液经滤膜过滤后离心处理,弃上清液,所得的沉淀即为总病毒粗提物;(4)提取核酸:所述总病毒粗提物加入核酸酶溶液,制成悬浮液,于37℃摇床处理25‑40min,而后提取总病毒核酸;(5)核酸扩增:对所述总病毒核酸进行扩增,以提高核酸浓度,有利于高通量测序。
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