[发明专利]一种贝类总病毒核酸的制备方法在审
申请号: | 201510201269.0 | 申请日: | 2015-04-23 |
公开(公告)号: | CN104946624A | 公开(公告)日: | 2015-09-30 |
发明(设计)人: | 姜敬哲;黄晟;何健;王江勇 | 申请(专利权)人: | 中国水产科学研究院南海水产研究所 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/93 |
代理公司: | 广州知友专利商标代理有限公司 44104 | 代理人: | 宣国华;马赟斋 |
地址: | 510300 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种贝类总病毒核酸的制备方法,包括以下步骤:(1)磨粉:在液氮环境下,将贝类组织样品磨成粉;(2)匀浆:贝类组织样品粉末中加入PBS缓冲液,然后匀浆成浆料;(3)获得总病毒粗提物:浆料经离心处理,所得的上清液经滤膜过滤后离心处理,弃上清液,所得的沉淀即为总病毒粗提物;(4)提取核酸:所述总病毒粗提物加入核酸酶溶液,制成悬浮液,于37℃摇床处理25-40min,而后提取总病毒核酸;(5)核酸扩增:对所述总病毒核酸进行扩增,以提高核酸浓度,有利于高通量测序。该方法操作简单,获得贝类总病毒核酸纯度高,且核酸完整,核酸浓度满足高通量测序的要求。 | ||
搜索关键词: | 一种 贝类 病毒 核酸 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种贝类总病毒核酸的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)磨粉:在液氮环境下,将贝类组织样品磨成粉;(2)匀浆:贝类组织样品粉末中加入PBS缓冲液,然后匀浆成浆料;(3)获得总病毒粗提物:浆料经离心处理,所得的上清液经滤膜过滤后离心处理,弃上清液,所得的沉淀即为总病毒粗提物;(4)提取核酸:所述总病毒粗提物加入核酸酶溶液,制成悬浮液,于37℃摇床处理25‑40min,而后提取总病毒核酸;(5)核酸扩增:对所述总病毒核酸进行扩增,以提高核酸浓度,有利于高通量测序。
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