[发明专利]一种利用多聚化合物提高RCA扩增效率的方法在审
| 申请号： | 201510206587.6 | 申请日： | 2015-04-28 |
| 公开（公告）号： | CN104845965A | 公开（公告）日： | 2015-08-19 |
| 发明（设计）人： | 戚智青;侯丹;齐晓雪 | 申请（专利权）人： | 华侨大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 泉州市文华专利代理有限公司 35205 | 代理人： | 陈智海 |
| 地址： | 362000 福*** | 国省代码： | 福建;35 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 一种利用多聚化合物提高RCA扩增效率的方法，包括：分别配置浓度为0.1g/ml的PEG 3350、0.2mg/l的mPEG-SC 2000和0.1mg/l的mPEG-SC 5000三种溶液；使用TempliPhi DNA测序模板扩增试剂盒，按照试剂盒的说明进行变性操作和培育操作，通过在滚环扩增过程中添加一定浓度的聚乙二醇或其衍生物，然后分别将RCA扩增产物于1％琼脂糖凝胶中进行电泳。本发明可以显著地提高滚环扩增的效率，增强滚环扩增的灵敏度，实现了对市售RCA试剂盒的进一步优化。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 化合物 提高 rca 扩增 效率 方法 | ||
【主权项】：
一种利用多聚化合物提高RCA扩增效率的方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)分别配置浓度为0.1g/ml的PEG 3350、0.2mg/l的mPEG‑SC 2000和0.1mg/l的mPEG‑SC 5000三种溶液，备用；(2)使用TempliPhiTM DNA测序模板扩增试剂盒：A.变性：以pUC 19质粒DNA作为模板，在5μl样品缓冲液中加入1ng pUC 19质粒DNA，混匀后，95℃加热3min，然后冷却至室温或4℃，获得变性样品液；B.培育：在5μl反应缓冲液中加入0.2μl Phi29DNA聚合酶，混匀，置于冰上，得到预混合酶液；将5μl预混合酶液加入所述变性样品液中，混匀，得到RCA反应液；在各RCA反应液中分别加入预设体积的PEG 3350溶液、mPEG‑SC 2000溶液、mPEG‑SC 5000溶液；各RCA反应液分别于30℃下水浴4‑18h；65℃加热10min，冷却至4℃；分别3μl RCA产物以1％琼脂糖凝胶取3μl反应混合液于1％琼脂糖凝胶中进行电泳。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于华侨大学，未经华侨大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201510206587.6/，转载请声明来源钻瓜专利网。
