[发明专利]一种利用L‑半胱氨酸再生羊毛角蛋白的方法

摘要

本发明涉及一种利用L‑半胱氨酸再生羊毛角蛋白的方法，包括将羊毛纤维洗净，用乙醇‑丙酮混合溶剂脱脂，剪碎；将剪碎的羊毛纤维加入到L‑半胱氨酸复合液体中，密封，在65～85℃下振荡3～8h，得到羊毛角蛋白溶液。然后热过滤，取滤液进行透析；透析后，调节pH值至4.0～4.5，使角蛋白完全析出，离心，对固体成分进行冷冻干燥，粉碎，得到羊毛角蛋白粉末。本发明简单实用，采用成本较低的L‑半胱氨酸溶解、醋酸沉析，制备分子量高、提取率高的角蛋白粉末。制成的角蛋白粉末稳定，可以较长时间贮存，粉末可以用于创伤医学，也可以选择合适溶剂溶解角蛋白粉末，与其他聚合物进行复合纺丝，应用于组织工程等。

主权项

一种利用L‑半胱氨酸再生羊毛角蛋白的方法，包括：(1)将羊毛纤维在H2O2碱性溶液中洗净，其中30％H2O2的浓度为6mL/L，纯碱的浓度为10g/L，温度为50℃，浴比40:1；再用乙醇‑丙酮混合溶剂脱脂12h，然后将烘干后的羊毛剪碎；其中，脱脂过程使用的脱脂剂浸没羊毛纤维即可，乙醇‑丙酮混合溶剂中乙醇与丙酮的体积比为2:1；(2)将剪碎后的羊毛纤维加入到L‑半胱氨酸‑尿素复合液体中，其中浴比20:1，L‑半胱氨酸用量为30g/L，尿素的用量为10mol/L；用200g/L的NaOH调节pH值至9.5～10.5，盖上塞子密封，升温至95℃，机械振荡4h后，得到羊毛和角蛋白的混合溶液；对羊毛、角蛋白混合溶液进行热过滤，取滤液；(3)对所得到的滤液透析72h，透析膜的截留分子量为8000～14000，每隔3h换一次去离子水；(4)透析完成后，边搅拌边向透析液中加醋酸溶液，调节其pH至4.0～4.5，使角蛋白完全析出；(5)将其静置2h后，去除上清液，对沉淀进行离心，离心转速为10000rpm，温度为10℃，时间为10min；(6)对离心所得沉淀冷冻24h，然后进行冷冻干燥，得到角蛋白固体；最终羊毛角蛋白分子量在8kDa以上的产量最高可达72％，分子量大部分集中在40～50kDa。