[发明专利]用于肉制品中掺假马源性成分快速鉴别的锁核酸探针荧光定量PCR方法及其引物和锁核酸探针序列

摘要

马源性成分锁核酸荧光定量PCR检测方法及其引物和锁核酸探针。本发明涉及将锁核酸探针技术应用于马源性成分的快速鉴别，建立的锁核酸荧光定量PCR方法具有快速、敏感、特异等优点，适应于肉制品中掺假马源性成分的快速检测。本发明包括引物和锁核酸序列的设计及锁核酸荧光定量PCR方法的建立。上游引物序列为：5’-CCCACTATCAGGATTCATACCC -3’；下游引物序列为：5’- AGTGAGGTGGAATAGGTTAGTCG -3’；锁核酸探针序列为：5’- FAM-ACACCAAAAATAGCAGCATCATCCTCC-BHQ1-3’锁核酸荧光定量PCR检测方法的反应体系为：20μL，包括10μL Probes Master 2×conc(包含有dNTP，Mg2+以及Taq酶等)，10μmol/L上述上下游引物F/R 各0.4μL，10μmol/上述锁核酸探针P 0.3μL，DNA 模板1μL，超纯水补至20μL。反应参数：95℃ 8min； 95℃，10s，58℃，30s（收集荧光信号），35～40个循环。

主权项

用于肉制品中掺假马源性成分快速鉴别的锁核酸探针荧光定量PCR的引物序列和探针序列，其特征是所述引物序列包括：上游引物序列为：5’‑CCCACTATCAGGATTCATACCC ‑3’；下游引物序列为：5’‑ AGTGAGGTGGAATAGGTTAGTCG ‑3’；所述锁核酸探针序列为：5’‑ FAM‑ACACCAAAAATAGCAGCATCATCCTCC‑BHQ1‑3’。