[发明专利]一种叶酸修饰的磺酸甜菜碱-壳聚糖纳米颗粒及其制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种叶酸修饰的磺酸甜菜碱‑壳聚糖纳米颗粒及其制备方法和应用。具体而言，本发明的纳米颗粒通过包括如下步骤的方法制得：1）包含叶酸、脱水缩合剂和缩合促进剂的混合溶液的制备；2）叶酸在磺酸甜菜碱‑壳聚糖上的接枝；以及3）纳米颗粒的透析和冻干。本发明提供的叶酸修饰的磺酸甜菜碱‑壳聚糖纳米颗粒具有良好的生物相容性和生物可降解性以及较强的抗蛋白吸附性能。另外，由于叶酸接枝的引入，本发明的磺酸甜菜碱‑壳聚糖纳米颗粒可以使其中包裹的化疗药物靶向于叶酸受体高表达的肿瘤细胞，提高了治疗效率。

主权项

1.一种用于制备肿瘤靶向药物的叶酸修饰的磺酸甜菜碱‑壳聚糖纳米颗粒的制备方法，该制备方法包括如下步骤：1）混合溶液的制备：按照叶酸:脱水缩合剂:缩合促进剂=1:1~1.2:1~1.2的摩尔比，将上述反应物加入到无水溶剂中，在室温条件下搅拌至溶解，得到混合溶液；所述脱水缩合剂选自N‑(3‑二甲基氨基丙基)‑N'‑乙基碳二亚胺盐酸盐、N,N'‑二异丙基碳二亚胺、N,N'‑二环己基碳二亚胺中的任意一种；所述缩合促进剂选自N‑羟基琥珀酰亚胺、1‑羟基苯并三氮唑、1‑羟基‑7‑偶氮苯并三氮唑中的任意一种；所述溶剂选自二甲基亚砜、乙醇、甲醇中的任意一种；2）叶酸的接枝：按照叶酸中的羧基:壳聚糖中的氨基=1:1的摩尔比，将步骤1）中得到的混合溶液缓慢加入到磺酸甜菜碱‑壳聚糖水溶液中，在室温、避光条件下搅拌16~24h，得到叶酸修饰的磺酸甜菜碱‑壳聚糖纳米颗粒水溶液；其中，所述磺酸甜菜碱‑壳聚糖通过下法制得：首先，按照1:1:5~6的重量比，将壳聚糖、磺酸甜菜碱和RAFT试剂溶解在含有1%盐酸和丙酮的混合溶液中，惰性气体除氧后密封，暴露在辐射剂量为10Gy/min的⁶⁰Co源下反应15~20h；其次，将反应物置于截留分子量为25000Da的透析袋中，用去离子水透析48~72h，得到留在透析袋中的磺酸甜菜碱‑壳聚糖水溶液；最后，将得到的水溶液于‑20℃预冻6~8h，然后冷冻干燥36~48h，得到两亲性纳米颗粒磺酸甜菜碱‑壳聚糖；其中：所述壳聚糖的脱乙酰度为95.2%，平均分子量为50000g/mol；所述磺酸甜菜碱为3‑[N,N‑二甲基‑[2‑(2‑甲基丙‑2‑烯酰氧基)乙基]铵]丙烷‑1‑磺酸内盐；所述RAFT试剂为S,S’‑二(R,R’‑二甲基‑R’’‑乙酸)三硫代碳酸酯；所述含有1%盐酸和丙酮的混合溶液中1%盐酸和丙酮的体积比为7:3；所述惰性气体选自氮气、氦气、氩气中的任意一种；3）透析和冻干：将步骤2）中得到的叶酸修饰的磺酸甜菜碱‑壳聚糖纳米颗粒水溶液置于透析袋中，首先用碱液透析12~18h，再用去离子水透析24~48h，将得到的透析液在12000~14000rpm下离心40~60min，最后将上清液冷冻干燥，得到叶酸修饰的磺酸甜菜碱‑壳聚糖纳米颗粒。