[发明专利]用于肉制品中鸭源性成分快速鉴别的锁核酸探针荧光定量PCR方法及其引物和锁核酸探针序列在审
| 申请号： | 201510212812.7 | 申请日： | 2015-04-29 |
| 公开（公告）号： | CN105671035A | 公开（公告）日： | 2016-06-15 |
| 发明（设计）人： | 许如苏;魏霜;周广彪;刘中勇;段建发;陈冠武;苏建晖 | 申请（专利权）人： | 中华人民共和国汕头出入境检验检疫局 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 515000 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明涉及将锁核酸探针应用于肉制品中鸭源性成分的快速鉴别。建立的锁核酸探针荧光定量PCR方法具有快速、敏感、特异等优点，因采用样品Ct值与纯鸭肉Ct值的绝对差值作为肉制品中鸭肉掺假的判定标准，解决了肉污染引起的掺假误判和非特异性反应引起的假阳性问题。适应于肉制品中鸭源性成分的快速检测。包括引物和锁核酸探针序列的设计。上游引物序列为：5’-ACCTTCCCGCACCCTCTAAT-3’；下游引物序列为：5’GGCAGATGGCGAGCAGAGAT-3’；锁核酸探针序列为：5’-CY5-ATCTCYG+CYTGATGAAACTTCGG-BHQ-3’荧光PCR 检测的反应体系为：20μL，包括10μL Probes Master 2×conc ( 包含有dNTP，Mg2+ 以及Taq 酶等)，10μmol/L上述上下游引物F/R 各0.8μL，10μmol/上述锁核酸探针P 0.3μL，DNA 模板1μL，超纯水补至20μL。反应参数：95℃8min；95℃，8s，58℃，25s（采集荧光信号），35～40循环。 | ||
| 搜索关键词： | 用于 肉制品 中鸭源性 成分 快速 鉴别 核酸 探针 荧光 定量 pcr 方法 及其 引物 序列 | ||
【主权项】：
用于肉制品中鸭源性成分快速鉴别的锁核酸探针荧光定量PCR的引物序列和探针序列，其特征是所述的引物和锁核酸探针的序列为：上游引物：5’‑ACCTTCCCGCACCCTCTAAT‑3’；下游引物：5’GGCAGATGGCGAGCAGAGAT‑3’；Taqman‑LNA探针：5’‑CY5‑ATCTCYG+CYTGATGAAACTTCGG‑BHQ3‑3’。
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