[发明专利]一种乳制品中乳清蛋白成分的快速分离检测方法

摘要

本发明提供一种乳制品中乳清蛋白成分的快速分离检测方法，包括步骤A，配制标准溶液或解冻标准溶液，步骤B，配制待测样品溶液，步骤C，HPLC分离和检测使用凝胶色谱柱分离所述标准溶液和待测样品溶液。本发明中，首先利用磷酸盐缓冲液溶解或稀释所述待测奶制品和/或标准品；然后利用凝胶色谱柱分离各种蛋白质组分，并用紫外检测器或二极管阵列检测器检测，通过与标准品峰面积的比较计算奶制品中每种乳清蛋白的含量。使用本发明之检测方法检测乳制品中的乳清蛋白，其检测快速、操作简便且重现性好。

主权项

一种乳制品中乳清蛋白成分的快速分离检测方法，包括如下步骤，步骤A，配制标准溶液或解冻标准溶液：称取包括牛乳IgG标准品、α‑乳清蛋白标准品、牛血清白蛋白标准品和β‑乳球蛋白标准品溶解于pH值为7.2～8.0的磷酸盐缓冲液中制得标准溶液，其中牛乳IgG标准品、α‑乳清蛋白标准品、牛血清白蛋白标准品和β‑乳球蛋白标准品在磷酸盐缓冲液中的重量浓度分别为0.002～0.01％、0.005～0.02％、0.005～0.02％和0.01～0.04％；所述标准溶液中还包括溶解于磷酸盐缓冲液中的乳铁蛋白标准品，且其中乳铁蛋白标准品的重量浓度为0.0001～0.001％；或者取配制时间在3个月以内且储藏在－25℃～－18℃环境下的所述标准溶液解冻；步骤B，配制待测样品溶液：使用pH值为7.2～8.0的磷酸盐缓冲液稀释待测样品至其中蛋白质含量≤x％，待测样品中本身蛋白质含量≤x％时不需稀释，且0.075≤x≤0.125；步骤C，HPLC分离和检测：使用凝胶色谱柱分离所述标准溶液和待测样品溶液，其中HPLC的流动相为乙腈、水和三氟乙酸的混合液；且使用紫外光谱仪或二极管阵列检测器检测并计算得到乳制品中乳清蛋白组分牛乳IgG、α‑乳清蛋白、牛血清白蛋白、β‑乳球蛋白和乳铁蛋白的含量；且其中使用的色谱柱包括两根串联的TSK G3000PWXl凝胶柱和一根预柱PWXl；所述流动相为乙腈35‑55wt％和水45‑65wt％的混合溶液中加入0.1‑0.2wt％的三氟乙酸而得到。