[发明专利]蓬松型皮胶原止血材料及其制备方法

摘要

本发明公开了一种蓬松型皮胶原止血材料的制备方法，其特点是以医用纯化猪真皮为原料，在维持猪皮胶原纤维三维结构不变的前提下，将其经反复碱膨胀、酸膨胀，使猪皮胶原纤维得到适度的分离和松散，再经碳化二亚胺改性、冻干、回湿、机械蓬松、灭菌等工艺，最终制备得到了一种棉絮状的蓬松型皮胶原止血材料。该材料完整地保留了天然猪皮胶原的三维立体网状结构，与普通胶原材料相比，本发明所制备的蓬松型皮胶原的结构稳定性、力学性能、生物降解性能更优，既具有良好的生物相容性、低免疫原性等生物学性能，又具备促进创面愈合和修复的功能，可用于创伤修复中的快速有效止血。

主权项

一种蓬松型皮胶原棉絮状止血材料的制备方法，包括如下步骤：(1)医用纯化猪真皮前处理：取医用纯化猪真皮，将其剪成5～20mm×5～20mm的规则小块，接着用生理盐水反复清洗3～5次，再用pH为7.5的Tris‑NaCl缓冲溶液浸泡2～4h；倾去缓冲液，用超纯水继续反复漂洗皮片3～5次，沥水备用；(2)碱膨胀：向不锈钢转鼓中投入按皮片重2.0％～7.0％的氢氧化钠，超纯水调节液比至3.0～5.0，待氢氧化钠充分溶解后，加入皮片，碱膨胀作用2～4h，检测医用纯化猪真皮的膨胀情况，倾去碱液；之后，按上述碱膨胀工艺重复3～6次，便得到碱膨胀纯化猪真皮；(3)水洗：加超纯水调节液比为3.0～5.0，常温下水洗10～30min，反复水洗3～5次，倾去废液，沥水；(4)酸膨胀：将液比为3.0～5.0、pH值为2.0～4.0的醋酸溶液投入不锈钢转鼓对皮片进行酸膨胀处理8～10h，检测纯化猪真皮的膨胀情况，倾去酸液；之后，按上述工艺反复酸膨胀3～6次，得到酸膨胀纯化猪真皮；(5)碳化二亚胺改性：室温下将80～120mM 2‑吗啉乙磺酸溶解在体积分数为50～80％的乙醇溶液中，将经过反复碱、酸膨胀处理后的医用纯化猪真皮浸泡在上述乙醇溶液中60～120min，接着加入30～60mM N‑羟基琥珀酰亚胺和1‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐，室温下搅拌反应12～48h，待反应结束后倾去废液，接着用体积分数为95％的乙醇清洗10～30min，反复清洗2～5次，最后用PBS缓冲液清洗10～12h，反复清洗2～5次，冷冻干燥备用；(6)机械蓬松：用喷枪将40～45℃热水均匀喷施于冻干医用纯化猪真皮皮片表面，再用塑料薄膜包裹密封静置120～150min，接着用轧花机对皮片进行反复蓬松操作，反复蓬松次数为3～6次，检查蓬松情况；最后剂量为6～30KGy/h60Co所产生的γ射线消毒灭菌，成型包装，即为成品；所述止血材料的主要性能指标如下：性状：白色或淡黄色絮状物，棉花状，无肉眼可见的杂物和变色；重金属含量：≤10μg/g；脂质体所占质量分数：≤1％(m/m)；羟脯氨酸所占质量分数：不小于总蛋白含量的9％(m/m)；细胞毒性：细胞毒性反应不大于1级；止血时间：20～60s。