[发明专利]高通量测序文库及其构建方法

摘要

本发明公开了一种高通量测序文库及其构建方法。该方法包括：S1，用引物混合物进行多重PCR得到多个目标片段；S2，对多个目标片段接头连接得到多个带接头的目标片段；和S3，对多个带接头的目标片段进行乳液PCR得到高通量测序文库；引物混合物为cDNA引物混合物和/或DNA引物混合物；cDNA引物混合物包括SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示第1对引物以及SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示第2对引物；DNA引物混合物包括SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6所示第3对引物以及SEQ ID NO：7和SEQ ID NO：8所示第4对引物。该方法可有效提高检测通量。

主权项

一种高通量测序文库的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括以下步骤：S1，利用引物混合物对多个目标区域进行多重PCR，得到多个目标片段；S2，对多个所述目标片段进行接头连接，得到多个带接头的目标片段；以及S3，对多个所述带接头的目标片段进行乳液PCR，得到所述高通量测序文库；其中，所述引物混合物为cDNA引物混合物，或者所述引物混合物为cDNA引物混合物和DNA引物混合物；当所述引物混合物为cDNA引物混合物时，所述cDNA引物混合物包括SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示的第1对引物以及SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示的第2对引物；当所述引物混合物为DNA引物混合物时，所述DNA引物混合物包括SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6所示的第3对引物以及SEQ ID NO：7和SEQ ID NO：8所示的第4对引物。