[发明专利]蓝莓休克病毒巢式RT-PCR检测试剂盒及其检测方法

摘要

本发明涉及一种蓝莓休克病毒巢式RT-PCR检测试剂盒及其检测方法，专用于蓝莓休克病毒的检测。该试剂盒包括：正向引物BlShV-f、外侧反向引物BlShV-r1、内侧反向引物BlShV-r2、RT Buffer、RNA酶抑制因子、反转录酶、dNTPs、PCR Buffer、Mgcl₂、Taq DNA聚合酶、阳性对照、阴性对照和RNase-free ddH₂O。本发明根据蓝莓休克病毒外壳蛋白CP基因序列设计3条特异性引物，利用巢式RT-PCR技术对蓝莓休克病毒进行检测，具有快速、准确、灵敏和特异性强的优点，适合于农业生产和进出境口岸检疫上蓝莓休克病毒的检测诊断、疫情监控及预警预报，应用前景广泛。

主权项

一种蓝莓休克病毒巢式RT‑PCR检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：1)正向引物：10μmol/L，引物序列为5’‑CCCCAAAGGATAAACAGGTCCA‑3’；2)外侧反向引物：10μmol/L，引物序列为5’‑TCACCACGTACAAATCCCT‑3’；3)内侧反向引物：10μmol/L，引物序列为5’‑CCCACCCAACCATTACCGAT‑3’；4)RT Buffer：5×；5)RNA酶抑制因子：40U/μL；6)反转录酶：200U/μL；7)dNTPs：10mmol/L；8)PCR Buffer：10×；9)Mgcl₂：25mmol/L；10)Taq DNA聚合酶：5U/μL；11)蓝莓休克病毒的阳性对照样品；12)不含蓝莓休克病毒的阴性对照样品；13)RNase‑free ddH₂O。