[发明专利]一种PLA2R抗体检测试纸条及制作、检测方法

摘要

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种PLA2R抗体检测试纸条及制作、检测方法。该试纸条利用双抗原夹心测抗体的原理，分别将PLA2R包被在硝酸纤维素膜上，量子点偶联的PLA2R喷涂在结合物垫上，再将粘性PVC底板上依次搭接样本垫、结合物垫、硝酸纤维素膜和吸水纸，并裁切成一定宽度的试纸条装成检测卡，可由荧光分析仪测出抗体浓度值，用于定量检测样本中的PLA2R抗体。利用量子点免疫层析法，可非创伤、低风险、安全、廉价、精确和快速的定量检测血清、血浆和全血中的PLA2R抗体含量，能为特发性膜性肾病的初筛和病情监测提供辅助作用。

主权项

一种PLA2R抗体检测试纸条的制作方法，其特征在于：包括以下步骤：a.用量子点偶联PLA2R得到量子点‑PLA2R复合物，并将其喷涂在结合物垫上；b.分别将PLA2R包被到硝酸纤维素膜上作为检测线，将PLA2R抗体包被到硝酸纤维素膜上作为质控线，检测线和质控线间的距离为3～10mm；c.在粘性底板上依次搭接样本垫、喷涂有量子点‑PLA2R复合物的结合物垫、设置有检测线和质控线的硝酸纤维素膜、吸水纸，并裁切成所需宽度，即为PLA2R抗体检测试纸条；所述步骤b的具体制作方法为：分别用0.005‑0.2M，pH6.0‑pH9.0的包被缓冲液稀释PLA2R和PLA2R抗体至0.1‑5mg/ml，所述包被缓冲液为磷酸盐缓冲液、硼砂缓冲液、碳酸盐缓冲液中的一种；用划膜仪或喷膜仪分别将PLA2R和PLA2R抗体包被到硝酸纤维素膜上，包被浓度为0.4‑2μl/cm；喷涂完毕后，放置在环境湿度为30％以下，温度在16℃‑45℃的环境中，烘干1h以上，封存；所述步骤a的具体制作方法为：将PLA2R加入到量子点溶液中或是将量子点加入到PLA2R溶液中偶联得到量子点‑PLA2R复合物；将量子点‑PLA2R复合物稀释5‑200倍，用喷膜仪按2‑100μl/cm的量喷涂到结合物垫上，在环境湿度小于30％，温度在35‑37℃的环境下烘烤1‑5h，干燥后封存。