[发明专利]一种纯化氧化型β‑烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的方法有效
申请号: | 201510255149.9 | 申请日: | 2015-05-19 |
公开(公告)号: | CN104876994B | 公开(公告)日: | 2017-11-03 |
发明(设计)人: | 傅荣昭;戴柱;张琦 | 申请(专利权)人: | 邦泰生物工程(深圳)有限公司 |
主分类号: | C07H19/207 | 分类号: | C07H19/207;C07H1/06 |
代理公司: | 深圳市君胜知识产权代理事务所(普通合伙)44268 | 代理人: | 王永文,刘杰 |
地址: | 518102 广东省深圳市*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种纯化氧化型β‑烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的方法,包括步骤将酶催化反应所得反应液用滤膜进行微滤和纳滤,收集浓缩液备用;然后将浓缩后的滤液加入酸调节浓缩液pH,用反相色谱柱为固定相,以缓冲盐溶液为A相、乙醇为B相,进行梯度洗脱纯化;将纯化所得的溶液用滤膜纳滤浓缩,然后用真空冷冻干燥机冻干。本发明使用反相高效液相色谱纯化氧化型β‑烟酰胺腺嘌呤二核苷酸,使得氧化型β‑烟酰胺腺嘌呤二核苷酸纯度高、收益好,达到产业化要求。 | ||
搜索关键词: | 一种 纯化 氧化 烟酰胺腺 嘌呤 核苷酸 方法 | ||
【主权项】:
一种纯化氧化型β‑烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的方法,其特征在于,包括步骤:a、对酶催化反应所得反应液先后进行微滤和纳滤,收集浓缩液备用;b、然后在浓缩液中加入磷酸或盐酸调节pH至3‑5,用反相色谱柱为固定相,以缓冲盐溶液为A相、乙醇为B相,进行梯度洗脱纯化;c、对步骤b所得的滤液进行纳滤,最后用真空冷冻干燥机冻干;所述步骤b中反相色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶;采用HCl回流法对所述十八烷基硅烷键合硅胶进行预处理;所述步骤b中缓冲盐溶液为甲酸和氢氧化钠配成的浓度为20mM的缓冲盐溶液;所述步骤b中缓冲盐溶液的pH为3‑5;所述步骤b中A相和B相的体积比大于3:97,小于1;所述步骤b 中梯度为3% ~ 15% B%。
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