[发明专利]以海藻酸钠、明胶复合凹土制备益生菌微胶囊的方法

摘要

本发明公开了以海藻酸钠、明胶复合凹土制备益生菌微胶囊的方法，该方法首先是纯化凹土，其次将凹土与海藻酸钠、明胶混合成复合壁材，接着将已制备好的益生菌菌悬液在一定的条件下与上述复合壁材混合均匀，然后缓慢滴入CaCl₂中固化成型，最后真空冷冻法干燥，获得益生菌微胶囊；本发明以海藻酸钠、明胶复合凹土作为壁材，既发挥靶向性和控释性，又提高其机械强度，该胶囊提高益生菌制备过程中的存活率以及经过胃环境到达肠的存活率。

主权项

以海藻酸钠、明胶复合凹土制备益生菌微胶囊的方法，该方法首先是纯化凹土，其次将凹土与海藻酸钠、明胶混合成复合壁材，接着将已制备好的益生菌菌悬液在一定的条件下与上述复合壁材混合均匀，然后缓慢滴入CaCl₂中固化成型，最后真空冷冻法干燥，获得益生菌微胶囊；其特征是该制备方法包括以下具体步骤：第一步凹土的纯化：将凹土采用电导率低于5μs/cm的去离子水浸泡20~28h，搅拌器以1000~1500rpm转速搅拌20~28h，静置分层，取中间层凹土悬液，以其5~20%的量继续加入上述去离子水，同样操作，重复2~3次，于105~120℃烘干，研磨，过筛，取200目至140目细土备用；第二步益生菌菌悬液的制备：将枯草芽孢杆菌、双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、粪链球菌、地衣芽孢杆菌或酵母菌培养至对数生长期后期，收集菌体，采用无菌生理盐水洗涤去培养基，将菌体悬浮于pH为2~9的磷酸盐缓冲体系中，并将浓度调节至10⁹~10¹⁰CFU/ml备用；第三步壁材与益生菌混合溶液的制备：将5‑50g的海藻酸钠、0‑50g的明胶和1‑40g的凹土悬浮至10L的菌悬液中，混合均匀；第四步微胶囊固化成型：将上述壁材与益生菌的混合溶液缓慢滴加入离子强度为0.01‑2mol/L、pH5‑8磷酸盐缓冲液配制的浓度为1‑50g/L的CaCl₂中，于20‑40℃固化成型10‑100分钟，获得粒径大小为100‑2000μm的微胶囊粒子；第五步真空冷冻干燥法获得益生菌微胶囊制剂：真空冷冻干燥法条件为：上述微胶囊粒子于‑40~‑75℃预冻2~3小时，迅速移入冷冻干燥机冷冻干燥20~28小时，使微囊制剂含水量≤2%，检测活菌剂中活菌数为10⁹~10¹²CFU/g。