[发明专利]一种从枸杞叶中同时制备芦丁、槲皮素化学对照品的方法

摘要

本发明涉及一种从枸杞叶中同时制备芦丁、槲皮素化学对照品的方法，该方法包括以下步骤⑴微孔树脂除杂枸杞叶醇提物用甲醇溶液溶解，过滤上微孔树脂柱分离，然后依次用水、20~35%甲醇溶液、70%甲醇溶液进行台阶梯度洗脱，收集70%甲醇水洗脱物，该甲醇水洗脱物经减压干燥，即得芦丁、槲皮素粗品；将芦丁、槲皮素粗品经硅胶柱色谱分离、洗脱，合并Rf值为0.3~0.5的馏分；馏分经减压干燥即得棕黄色粉末状的芦丁、槲皮素类组分；⑶反相液相制备色谱精制芦丁、槲皮素类组分用甲醇溶液溶解，经过滤、高效反相液相制备色谱柱分离，收集制备色谱图中两个主要的色谱峰馏分，该色谱峰馏分经减压干燥即得黄色粉末状的芦丁与槲皮素对照品。本发明工艺简单、易规模化。

主权项

一种从枸杞叶中同时制备芦丁、槲皮素化学对照品的方法，包括以下步骤：⑴微孔树脂除杂：按常规方法制得的枸杞叶醇提物用其质量5~10倍的体积分数30%~60%甲醇溶液溶解，过滤得到滤液A，该滤液A上微孔树脂柱分离后依次用2~5倍柱体积的水、20~35%甲醇溶液、70%甲醇溶液进行台阶梯度洗脱，收集70%甲醇水洗脱物，该甲醇水洗脱物经减压干燥，即得芦丁、槲皮素粗品；所述枸杞叶醇提物与所述微孔树脂比例为1 g：30 mL；⑵硅胶柱色谱富集：将所述芦丁、槲皮素粗品经硅胶柱色谱分离，用3~5倍柱体积的氯仿‑甲醇‑水的混合溶剂洗脱，按每份500 mL收集馏分，并经薄层色谱检测，其中展开剂为氯仿‑甲醇‑水混合溶剂，显色剂为体积浓度10%的浓硫酸乙醇溶液，合并Rf值为0.3~0.5的馏分；所述Rf值为0.3~0.5的馏分经减压干燥即得棕黄色粉末状的芦丁、槲皮素类组分；所述硅胶柱的尺寸为30 mm~60 mm×60 mm ~100 mm；⑶反相液相制备色谱精制：所述芦丁、槲皮素类组分用其质量10~20倍的体积分数为40~60%的甲醇溶液溶解，然后配制样品浓度为50.0~100.0 mg/mL，经0.45 μm微孔滤膜过滤，得到滤液B；该滤液B采用高效反相液相制备色谱柱进行分离，并经检测波长为254 nm的紫外检测器检测，收集制备色谱图中两个主要的色谱峰馏分，该色谱峰馏分经减压干燥即得黄色粉末状的芦丁与槲皮素对照品。