[发明专利]一种百两金皂苷B对照品的制备方法

摘要

本发明以制备型高效液相色谱为分离手段，以一定比例的含甲醇或乙醇或乙腈的水溶液为洗脱体系，目标峰洗脱液直接减压浓缩干燥即可获得纯度大于98％的百两金皂苷B化学对照品。其制备过程包括如下步骤：(1)百两金药材的提取；(2)大孔吸附树脂柱分离；(3)制备型高效液相色谱分离纯化，最终得到百两金皂苷B化学对照品；该对照品采用薄层色谱多个展开系统及显色方法检查均为一个色谱斑点，进一步采用高效液相色谱‑蒸发光散射检测法(HPLC‑ELSD)检查，其目标峰用峰面积归一化法计算，质量浓度大于98％；变换不同色谱柱及多个流动相系统，测定结果均一致。说明制备的百两金皂苷B符合中药定量分析用化学对照品的要求。本制备方法纯度高、色泽好、成品收率较高，可以规模化生产。

主权项

1.一种百两金皂苷B化学对照品的分离制备方法，其特征在于：以制备型高效液相色谱为分离手段，以一定比例的甲醇水溶液为洗脱体系，获得纯度大于98％的百两金皂苷B化学对照品；具体步骤为：1)取百两金药材，粉碎成颗粒，加60％～80％的乙醇回流提取，过滤，减压回收醇得提取液；2)将提取液上大孔吸附树脂柱，水洗至洗脱液近无色，弃去洗脱液；用浓度低于20％的乙醇洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液；用80％乙醇洗脱至洗脱液近无色，收集洗脱液，减压浓缩干燥得浸膏；3)将2)的浸膏用制备液相的流动相溶解使成为过饱和溶液，离心，取上清液，用制备型高效液相色谱分离纯化；色谱条件：以反相化学键合相C18为填充剂，甲醇水溶液为流动相，在线紫外监测，波长为205nm，收集目标峰直接浓缩干燥，即得到纯度大于98％的百两金皂苷B；其中，所述的回流提取溶剂加入量为10倍药材量，回流提取3次，每次2小时；其中，所述的大孔吸附树脂为非极性或弱极性大孔吸附树脂；其中，所述的制备型高效液相色谱洗脱体系甲醇与水的体积比为62∶38～72∶28。