[发明专利]一种检测水体鸭粪污染的巢式PCR试剂盒及其检测方法有效
申请号: | 201510300317.1 | 申请日: | 2015-06-05 |
公开(公告)号: | CN104878002B | 公开(公告)日: | 2018-09-11 |
发明(设计)人: | 张徐祥;何席伟;陈慧梅;于红霞;史薇 | 申请(专利权)人: | 南京大学 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12Q1/686;C12Q1/6888 |
代理公司: | 南京知识律师事务所 32207 | 代理人: | 蒋海军 |
地址: | 210046 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种检测水体鸭粪污染的巢式PCR试剂盒及其检测方法,属于水体污染检测领域。一种检测水体中鸭粪污染的巢式PCR试剂盒,包括两对巢式PCR引物、dNTP、PCR buffer、Taq酶、Mg2+溶液和ddH2O,该巢式PCR方法使用两轮PCR扩增,检测方法如下:提取待测水样DNA,以其为模板进行第一轮PCR扩增,引物为SDF、SDR,反应结束后,以第一轮PCR产物为模板,进行第二轮PCR扩增,引物为NDF、NDR,反应结束后,琼脂糖凝胶电泳检测158bp条带存在表明水体收受到鸭粪污染。该方法通过巢式PCR扩增,大大增加了检测的灵敏度,可以检测到水中存在的微量鸭粪污染,并且具有良好的特异性,可直接应用于水体粪便污染检测及防治工作中。 | ||
搜索关键词: | 一种 检测 水体 污染 pcr 试剂盒 及其 方法 | ||
【主权项】:
1.一种检测水体鸭粪污染的巢式PCR试剂盒,包括两对巢式PCR引物、dNTP、PCR buffer、Taq酶、Mg2+溶液和ddH2O,其特征在于:所述的两对巢式PCR引物为:SDF:5’‐GCATAGGGCAACACGGAAAG‐3’;SDR:5’‐GTTCTGGGTGTTGTCCGGTA‐3’;NDF:5’‐CCACGTAAATGCCAAAGATG‐3’;NDR:5’‐CTGAGCTAGAGGAAGGCT‐3’。
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