[发明专利]一种同时检测水中狗、猪、鸡粪便污染的PCR试剂盒及其检测方法

摘要

本发明公开了一种同时检测水中狗、猪、鸡粪便污染的PCR试剂盒及其检测方法，属于水体粪便污染检测领域。一种同时检测水中猪、狗、鸡粪便污染的试剂盒，包括引物、dNTP、PCR buffer、Mg2+溶液和ddH20，利用该试剂盒检测水体粪便污染方法如下提取待测水样DNA，以其为DNA为模板，利用试剂盒中提供的引物、dNTP、PCR buffer、Taq酶、Mg2+溶液和ddH20进行PCR扩增，PCR产物通过琼脂糖凝胶电泳后在紫外灯下观察，若出现390bp、490bp、和783bp的条带，则分别对应指示水中存在狗、猪、鸡粪便污染。该试剂盒可准确检测到水中单独存在或随机组合存在的狗、猪、鸡粪便污染，最多可同时检测到以上三种粪便污染，在排查粪便污染源时，可在很大程度上节省检测时间和费用，具有较高的应用前景。

主权项

一种采用PCR试剂盒同时检测水体中狗、猪、鸡粪便污染的方法，其特征在于，所述的PCR试剂盒包括引物、dNTP、PCR buffer、Taq酶、Mg2+溶液和ddH2O，所述的引物为混合引物，包括：引物1：5’‑CTGTGCTATGTCAGTATCTCCAG‑3’；引物2：5’‑GGCTGATTAGTCATTAGTCCATCG‑3’；引物3：5’‑CTACTCATACCCAGCAAGCC‑3’；引物4：5’‑TAGGAATTAATAGGGCGGGTG‑3’；引物5：5’‑CACATGTTATCTGCACCAGC‑3’；引物6：5’‑GTTAAGGGTACGAGTTTGTCG‑3’；检测的具体步骤如下：提取待测水样DNA，以待测水样DNA为模板，利用试剂盒中提供的引物1‑6、dNTP、PCR buffer、Mg2+溶液和ddH2O进行PCR扩增，PCR产物通过琼脂糖凝胶电泳后在紫外灯下观察条带存在情况，以此判断水体粪便污染情况。