[发明专利]疟原虫的检测方法和检测系统有效
申请号: | 201510307013.8 | 申请日: | 2015-06-05 |
公开(公告)号: | CN104897644B | 公开(公告)日: | 2018-07-27 |
发明(设计)人: | 董瑞玲;顾大勇;易品;张树平;朱玉兰;刘胜牙 | 申请(专利权)人: | 深圳国际旅行卫生保健中心 |
主分类号: | G01N21/65 | 分类号: | G01N21/65;G01N1/28 |
代理公司: | 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人: | 生启 |
地址: | 518033 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种疟原虫的检测方法,包括如下步骤:提供待测样本,并且对待测样本进行处理得到红细胞悬液;配制含有皂素的裂解液;将红细胞悬液与裂解液混合并充分裂解后进行离心并保留第一沉淀,接着将第一沉淀充分裂解后进行离心并保留第二沉淀,接着用生理盐水洗涤第二沉淀至少三次后进行离心并保留第三沉淀;采用拉曼激光照射第三沉淀并且收集得到拉曼信号;以及对拉曼信号进行分析从而判断待测样本中是否含有疟原虫。这种疟原虫的检测方法通过皂素使疟原虫从红细胞内释放出来,再经过裂解疟原虫细胞膜从而获得疟色素,使疟色素浓缩起来,结合拉曼光谱技术,检测灵敏度较高。本发明还公开了一种疟原虫的检测系统。 | ||
搜索关键词: | 疟原虫 检测 方法 系统 | ||
【主权项】:
1.一种疟原虫的检测方法,其特征在于,包括如下步骤:提供待测样本,并且对所述待测样本进行处理得到红细胞悬液;配制含有浓度为0.1g/L~0.5g/L的皂素的裂解液,其中,所述裂解液中还含有浓度为8g/L~10g/L的NaCl、浓度为0.1g/L~0.3g/L的KCl、浓度为3.5g/L~4.0g/L的Na2HPO4·12H2O以及浓度为0.2g/L~0.3g/L的K2HPO4;将所述红细胞悬液与所述裂解液按照体积比为1:5~20混合并充分裂解后进行离心并保留第一沉淀,接着将所述第一沉淀充分裂解后进行离心并保留第二沉淀,接着用生理盐水洗涤所述第二沉淀至少三次后进行离心并保留第三沉淀,其中,将所述红细胞悬液与所述裂解液按照体积比为1:5~20混合并充分裂解的操作中,充分裂解的温度为36℃~38℃,充分裂解的时间为10min~15min;将所述第一沉淀充分裂解的操作中,充分裂解的温度为37℃,充分裂解的时间为10min~15min;所述进行离心并保留第一沉淀的操作中,离心的转速为3000rpm~5000rpm,离心的时间为10min~15min;所述进行离心并保留第二沉淀的操作中,离心的转速为3000rpm~5000rpm,离心的时间为10min~15min;所述进行离心并保留第三沉淀的操作中,离心的转速为3000rpm~5000rpm,离心的时间为10min~15min;采用拉曼激光照射所述第三沉淀并且收集得到拉曼信号;以及对所述拉曼信号进行分析从而判断所述待测样本中是否含有疟原虫。
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