[发明专利]用于检测中药口服液体制剂中乳杆菌的培养基和检测方法

摘要

本发明涉及一种用于检测中药口服液体制剂中，是否污染乳杆菌的检测方法，以及用于检测中药口服液体制剂中乳杆菌的培养基，其包括有（1）一种为乳杆菌增菌培养基蛋白胨5.0g、酵母浸出粉4.0g、葡萄糖10.0g、蔗糖、10.0g、磷酸氢二钾1.0g、硫酸镁0.3g、聚山梨酯805.0g、山梨酸钾3g、水1000mL；（2）另一种为乳杆菌琼脂培养基蛋白胨10.0g、葡萄糖5.0g、蔗糖5.0g、氯化钠3.0g、酵母浸出粉5.0g、L‑胱氨酸1.0g、磷酸氢二钾1.0g、琼脂17g、山梨酸钾3g、水1000mL。本发明对中药口服液体制剂生产线关键区域进行连续监控，可以及时发现生产线存在的污染隐患，及时排除，防止大规模污染事件的发生。

主权项

一种用于检测中药口服液体制剂中乳杆菌的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）制备乳杆菌增菌培养基，为液体培养基，用于乳杆菌的前增菌培养；其成分为：蛋白胨5.0g、酵母浸出粉4.0g、葡萄糖10.0g、蔗糖、10.0g、磷酸氢二钾1.0g、硫酸镁0.3g、聚山梨酯80 5.0g、山梨酸钾3g、水1000mL；采用以下方法制成：上述成分中除葡萄糖和蔗糖外，煮沸溶解，然后加入葡萄糖和蔗糖溶解后，摇匀，调节pH值5.5~6.0，分装，115℃，30min灭菌；（2）制备乳杆菌琼脂培养基，为固体琼脂培养基，用于增菌液的划线培养，其成分为：蛋白胨10.0g、葡萄糖5.0g、蔗糖5.0g、氯化钠3.0g、酵母浸出粉5.0g、L‑胱氨酸1.0g、磷酸氢二钾1.0g、琼脂17g、山梨酸钾3g、水1000mL；采用以下方法制成：上述成分中除葡萄糖和蔗糖外，煮沸溶解，然后加入葡萄糖和蔗糖溶解后，摇匀，调节pH值5.5~6.0，分装，115℃，30min灭菌，倾注平皿；（3）取供试品，接种至乳杆菌增菌培养基中，37℃±1℃，厌氧，振荡培养18～24小时，振摇速度100～150r/min；（4）取上述培养物，划线接种至乳杆菌琼脂培养基中，37℃±1℃，厌氧，培养24～48小时；（5）如果平皿上出现菌落具有以下特征：灰白色，菌落中心颜色较深，圆形凸起，光滑，边缘整齐，菌落直径1.0～1.5mm，且培养皿散发出乳酸味道，则应挑选2～3个菌落，分别接种于乳杆菌琼脂培养基，37℃±1℃，厌氧，培养24～48小时，取培养物进行革兰染色镜检和适宜的鉴定试验，根据结果判断是否检出乳杆菌；（6）如果平板上无菌落生长或无典型菌落生长，判产品未检出乳杆菌。