[发明专利]一种适用于菲律宾蛤仔的三倍体化学诱导方法

摘要

本发明涉及一种适用于菲律宾蛤仔的三倍体化学诱导方法，包括：(1)蛤仔亲贝的选择及促熟：(2)亲贝处理及配子排放；(3)卵液选择及处理；(4)精液选择及处理；(5)同步受精，镜检及分组；(6)在处理组的受精卵中加入细胞松弛素B；(7)去除受精卵溶液中的细胞松弛素B及孵化，获得三倍体菲律宾蛤仔胚胎。本发明利用菲律宾蛤仔受精卵的结构和发育特点，采用单一个体催产，优选精卵进行受精，有效的消除了以往双壳类三倍体诱导过程中混合精卵发育同步性差的缺陷，有效提高了三倍体诱导率。本发明适用于高效诱导菲律宾蛤仔三倍体，具有诱导率高、稳定性强的优点，诱导率稳定在85％以上。

主权项

一种适用于菲律宾蛤仔的三倍体化学诱导方法，其特征在于：包括步骤如下：(1)蛤仔亲贝的选择及促熟：选取滩涂采捕亲贝，在室内升温促熟，达到性腺充分成熟；(2)亲贝处理及配子排放；将亲贝置入砂滤海水中进行催产，然后将开始排放配子的亲贝选出，单个置于烧杯中排放配子，获得多杯卵液和多杯精液；(3)卵液选择及处理；镜检上述步骤(2)获得多杯卵液中的每杯卵液，选择发育良好的多杯卵液进行合并，卵子悬浮液以90μm筛绢过滤去除组织碎片，以30μm筛绢清洗3次，收集卵子，置入塑料烧杯备用；(4)精液选择及处理；镜检上述步骤(2)获得多杯精液中的每杯精液，选取活力良好的一杯，用30μm筛绢滤除组织碎片，作为备用精子；(5)同步受精，镜检及分组；取上述备用精子加入到上述步骤(3)的卵子悬浮液中，精卵比为3:1‑5:1，然后将受精卵分成处理组和对照组；(6)在处理组的受精卵中加入细胞松弛素B；观察对照组受精卵出现第一极体的比例达到总卵数的80％时，迅速向处理组加入细胞松弛素B至终浓度为0.5mg/L；(7)去除受精卵溶液中的细胞松弛素B及孵化；观察对照组中80％至90％的第一极体下方出现第二极体时，以30μm筛绢洗卵，砂滤海水清洗，去除细胞松弛素B，然后孵化发育至担轮幼虫或D形幼虫。