[发明专利]基于银纳米粒子三聚体的表面增强拉曼散射效应超灵敏检测甲胎蛋白的方法

摘要

基于银纳米粒子三聚体的表面增强拉曼散射效应超灵敏检测甲胎蛋白的方法，属于分析化学技术领域。本发明具体包括15nm粒径银纳米粒子的合成、银纳米粒子修饰DNA、银纳米粒子三聚体的组装，并对其进行TEM表征和拉曼信号测试。本发明首次通过组装银纳米粒子三聚体，银纳米粒子三聚体具有强的拉曼信号，在外加甲胎蛋白后拉曼信号发生变化，用此拉曼信号的变化实现了甲胎蛋白的快速超灵敏检测。

主权项

基于银纳米粒子三聚体的表面增强拉曼散射效应超灵敏检测甲胎蛋白的方法，其特征在于包括银纳米粒子的合成，银纳米粒子三聚体的组装及结构表征、拉曼信号测试，用银纳米粒子三聚体检测甲胎蛋白；具体步骤如下：（1）银纳米粒子的合成：进行15nm粒径银纳米粒子的合成；（2）银纳米粒子三聚体的组装：取三管50mL已浓缩好的15nm粒径银纳米粒子溶胶，分别和50mL巯基修饰的甲胎蛋白的适配体及其互补序列进行偶联，在室温下过夜反应，分别在13000r/min离心15min，弃上清，后用50mL的超纯水分散沉淀，待用；将 50mL银‑适配体、50mL银‑互补序列1、50mL银‑互补序列2于150mL的5 mM PB缓冲液中，杂交反应12h，组装产物离心15 min，弃上清，后用100mL的超纯水分散，进行TEM和拉曼表征；适配体：5’‑SH‑GGCAGGAAGA CAAACAGGAC CGGGTTGTGT GGGGTTTTAA GAGCGTCGCC TGTGTGTGGT CTGTGGTGCT GT‑3’；互补序列1：5’‑SH‑CCGGTCCTGT TTGTCTTCCT‑3’，互补序列2：5’‑SH‑GGCGACGCTC TTAAAACCCC A‑3’；（3）甲胎蛋白的检测：将甲胎蛋白加入已组装好的银纳米粒子三聚体中，反应10min，进行拉曼测试。