[发明专利]一种南美白对虾半同胞家系构建方法

摘要

本发明公开了南美白对虾半同胞家系构建方法，该方法包括成熟亲虾的挑选、亲虾个体的标记与交配方案的设定、精荚的获得、精子的活化、雌虾产卵及卵子的收集、人工授精、受精卵的孵化、无节幼体的收集等步骤。本发明方法与传统的人工精荚移殖法相比，不会对雌虾造成伤害，可同时建立多个半同胞家系；将精子通过人工释放于产卵水体中，可避免自然交配导致的不交配或者交配后雌虾精荚脱落的缺陷；本发明在设定的近交系数的前提下，人为地设计交配方案，可有效避免所建家系的近交衰退，是一种高效的南美白对虾家系构建方法。

主权项

一种南美白对虾半同胞家系构建方法，其特征在于：采用如下步骤：（1）成熟亲虾的挑选：家系建立当天，进行亲虾选择，选择体形强壮，附肢健全，体色透明，胃肠饱满，体表光滑，无附着物，规格在35‑50克/尾，体长15‑18cm，经定期抽检不携带特定病原，且事先在亲虾培育池中按照雌、雄虾分别进行强化培育、性腺已发育成熟的雌、雄虾作为亲虾；其中，雌虾的选择：性腺成熟的雌虾从表面观察生殖腺颜色为红色，每体节卵巢分叶清晰，性腺在第一、二腹节的突起大，卵粒饱满，根据性腺的发育情况判断当天可以产卵的雌虾，选出后分别单独暂养于体积为1立方米的小水槽中；雄虾的选择：观察雄虾第五步足基部的精荚囊饱满，精荚呈乳白色，选出后单独暂养于体积为1立方米的网箱或小水槽中；所述雌、雄虾暂养的养殖水体水环境与亲虾培育池相同，亲虾培育池中，雌、雄虾池水温分别为30±0.5℃、28±0.5℃，盐度均为31±1，溶氧均控制在5mg.L‑1；（2）亲虾个体的标记与交配方案的设定：雌雄亲虾用眼柄套环进行个体标记，并确定定向交配方案，按一尾雄虾与二至三尾雌虾进行定向交配；（3）精荚的获得：根据步骤（2）设定的交配方案，挑选一尾成熟的雄虾，记录亲虾套环编号，用大拇指和食指在雄虾第五部步足基部从虾体侧向腹部进行按压，精荚突出即用镊子将精荚取出，按压过程注意操作力度以免雄虾受伤，取完精荚的雄虾，于10ppm的聚维酮碘溶液中消毒1min后，放入原亲虾培育池中备用；（4）精子的活化：将步骤（3）取得的精荚放入200目筛绢网中，于盛有灭菌的无钙生理盐水烧杯中充分搓洗让精子释放，获得精子释放液；将精子释放液视半同胞家系的构建个数，平均分成2~3份，备用；（5）雌虾产卵及卵子的收集：将在暂养池中自然产卵后的雌虾移入亲虾培育池中备用，所产卵子分别用网目为100目的筛绢网收集后分别移入装有10L过滤海水的受精桶中；（6）人工授精：将精子释放液分别泼入装有定向交配雌虾所产卵子的受精桶中，并用消毒过的玻璃棒进行充分搅拌，使精卵充分混合，直接结合授精；（7）受精卵的孵化：精卵充分混合后10分钟，用网目为100目的筛绢网对各个受精桶中的受精卵进行收集，分别移入体积为1立方米的小水槽中单独孵化，孵化密度为20万粒/立方水体以下，孵化水温29±0.5℃，微充气或每隔2h搅拌水体一次，使卵子均匀分布于水孵化水体中；（8）无节幼体的收集：受精13小时后，用200目筛绢网收集无节幼体，并计算无节幼体的量，进行半同胞家系的标准化育苗培养；所述用于活化精子的无钙生理盐水用量为：每个精荚所用无钙生理盐水不超过500mL；步骤（6）人工授精时，受精桶中精子的浓度为：每L水体含精块质量在1g以上；所述卵子产出至卵子进入精子释放液中的时间在1小时之内。