[发明专利]温度敏感型载体pBBR1MCS‑2‑Ts2及其应用

摘要

本发明公开了温度敏感型载体pBBR1MCS‑2‑Ts2及其应用。本发明所提供的温度敏感型载体pBBR1MCS‑2‑Ts2，是将SEQ ID No.1的第1557‑2526位所示的DNA片段替换为目的基因表达盒，并保持SEQ ID No.1的其他核苷酸不变，得到的重组载体；目的基因表达盒编码的蛋白质为将SEQ ID No.2所示的蛋白质进行A2)的改造、保持SEQ ID No.2的其它氨基酸残基均不变得到的蛋白质所述A2)为将SEQ ID No.2第130位的His突变为Gln。

主权项

构建重组载体的方法，是将SEQ ID No.1的第1557‑2526位所示的DNA片段替换为目的基因表达盒，并保持SEQ ID No.1的其他核苷酸不变，得到的重组DNA即为所述重组载体；所述目的基因表达盒编码的蛋白质为将SEQ ID No.2所示的蛋白质进行A2)的改造、保持SEQ ID No.2的其它氨基酸残基均不变得到的蛋白质：所述A2)为将SEQ IDNo.2第130位的His突变为Gln；所述目的基因表达盒中的目的基因为将SEQ ID No.1的第1794‑2456位核苷酸所示的DNA分子进行B2)的改造、保持SEQ ID No.1的第1794‑2456位核苷酸所示的DNA分子中的其它核苷酸均不变得到的DNA分子；所述B2)为将SEQ ID No.1第2183位的C突变为G；所述目的基因表达盒中启动所述目的基因表达的启动子为将SEQ ID No.1的第1557‑1793位所示的DNA分子进行如下C2)的改造、保持SEQ ID No.1的第1557‑1793位核苷酸所示的DNA分子中的其它核苷酸均不变得到的DNA分子：C2)如下C21)和C22)：C21)将SEQ ID No.1第1732位的A突变为G；C22)将SEQ ID No.1第1780位的G突变为T；所述目的基因表达盒中终止所述目的基因表达的终止子为SEQ ID No.1的第2457‑2526位所示的DNA分子。