[发明专利]一种体外培养睾丸组织诱导生成精子细胞的方法有效
申请号: | 201510347492.6 | 申请日: | 2015-06-19 |
公开(公告)号: | CN104974982B | 公开(公告)日: | 2018-07-06 |
发明(设计)人: | 李向东;姚建飞 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
主分类号: | C12N5/076 | 分类号: | C12N5/076 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君 |
地址: | 100193 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明涉及细胞工程领域,具体提供一种体外培养睾丸组织诱导生成精子细胞的方法,包括如下步骤:(1)培养胶块的制备:将1.2%的琼脂糖胶切块置于6孔板中,加入培养基浸泡过夜后,吸掉旧培养基,加入新鲜培养基,此时的琼脂糖胶块用作培养胶块;所述培养基的成分及含量为:90%MEMα+10%KSR;(2)取新生5.5天和新生10.5‑12.5天的小鼠睾丸,去外层白膜,分割成块状组织样品;(3)将组织样品置于前述的培养胶块上,将6孔板置于细胞培养箱中进行培养;(4)新生5.5天的小鼠睾丸组织培养22‑25天得到圆形精子;新生10.5‑12.5天的小鼠睾丸组织培养27天左右得到长形精子。 | ||
搜索关键词: | 小鼠睾丸 培养基 胶块 精子细胞 琼脂糖胶 组织培养 睾丸组织 种体 诱导 细胞培养箱 新鲜培养基 块状组织 细胞工程 圆形精子 组织样品 长形 精子 切块 制备 浸泡 分割 | ||
【主权项】:
1.一种体外培养睾丸组织诱导生成精子细胞的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:(1)培养胶块的制备:将1.2%的琼脂糖胶切块置于孔板中,加入培养基浸泡过夜后,吸掉旧培养基,加入新鲜培养基,此时的琼脂糖胶块用作培养胶块;所述培养基的成分及含量为:90%MEMα+10%KSR;(2)取新生10.5‑12.5天的小鼠睾丸,去外层白膜,分割成块状组织样品;(3)将组织样品置于前述的培养胶块上,将孔板置于细胞培养箱中进行培养;(4)新生10.5‑12.5天的小鼠睾丸组织培养27天得到长形精子。
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