[发明专利]一种含葡萄糖异构酶细胞的固定化方法有效
| 申请号： | 201510349443.6 | 申请日： | 2015-06-19 |
| 公开（公告）号： | CN104962546B | 公开（公告）日： | 2021-02-26 |
| 发明（设计）人： | 金利群;郑裕国;郭东京;柳志强 | 申请（专利权）人： | 浙江工业大学 |
| 主分类号： | C12N11/14 | 分类号： | C12N11/14;C12N11/089;C12N9/92;C12R1/19 |
| 代理公司： | 上海容慧专利代理事务所(普通合伙) 31287 | 代理人： | 于晓菁 |
| 地址： | 310014 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种含葡萄糖异构酶细胞的固定化方法，所述方法是将含葡萄糖异构酶基因的重组基因工程菌经发酵培养获得的湿菌体加入缓冲液中，制成菌悬液；向菌悬液中添加载体，搅拌混匀，再加入聚乙烯亚胺，然后加入戊二醛进行交联，0～30℃搅拌交联1～2h后，过滤，滤饼用蒸馏水洗涤后用轴向挤压机挤压成长条状，室温风干后，粉碎成粒，得含葡萄糖异构酶的固定化葡萄糖异构酶细胞；本发明所提供的固定化方法具有固定化材料成本低，操作简单，机械强度高，在高温条件下较稳定，制备的固定化产葡萄糖异构酶重组大肠杆菌全细胞用于高温条件下催化D‑葡萄糖生产D‑果糖，在85℃的条件下，转化率高达54％，重复使用10批次后，仍具有90％以上的酶活，具有良好的工业化应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 葡萄糖 异构酶 细胞 固定 方法 | ||
【主权项】：
一种含葡萄糖异构酶细胞的固定化方法，其特征在于所述方法为：将含葡萄糖异构酶基因的重组基因工程菌经发酵培养获得的湿菌体加入缓冲液中，制成菌悬液；向菌悬液中添加硅藻土，搅拌混匀，再加入聚乙烯亚胺，然后加入戊二醛进行交联，0～30℃搅拌交联1～2h后，抽滤，滤饼用蒸馏水洗涤后用轴向挤压机挤压成长条状，室温风干后，粉碎成粒，获得含葡萄糖异构酶细胞的固定化颗粒；所述硅藻土与菌悬液中湿菌体重量比为0.01～0.1：1。
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