[发明专利]一种检测结核分枝杆菌生物被膜产膜能力的方法在审
申请号: | 201510350580.1 | 申请日: | 2015-06-24 |
公开(公告)号: | CN104988217A | 公开(公告)日: | 2015-10-21 |
发明(设计)人: | 于录;王超;杨志强;郭娜;汪杨;唐旭东;孟日增;安雅男;张巧丽;施晓晨 | 申请(专利权)人: | 吉林大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04 |
代理公司: | 长春市东师专利事务所 22202 | 代理人: | 张铁生 |
地址: | 130062 吉林*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | 本发明公开了一种检测结核分枝杆菌生物被膜产膜能力的方法,它包括:1)提取结核分枝杆菌总RNA,反转录成cDNA;2)以cDNA为模板,用内参基因16SrRNA引物,检测基因Rv3519引物荧光定量PCR检测;最后由公式:Rv3519基因的相对表达量=2-ΔΔCt,计算结核分枝杆菌中Rv3519基因的相对含量。确定结核分枝杆菌中的Rv3519表达差异,通过对不同的结核分枝杆菌检测,结果表明Rv3519表达量越高,成膜能力越强,与对结核分枝杆菌培养后,再进行结晶紫染色法检测被膜的结果相符。时间短、操作简便、特异性好、灵敏度高、检测成本低,不需要对结核分枝杆菌进行培养,安全可靠。为研究结核分枝杆菌的耐药性提供可靠的实验基础。 | ||
搜索关键词: | 一种 检测 结核 分枝杆菌 生物 被膜产膜 能力 方法 | ||
【主权项】:
一种检测结核分枝杆菌生物被膜产膜能力的方法,它包括:1)提取结核分枝杆菌总RNA,反转录成cDNA;2)以cDNA为模板,用内参基因16SrRNA的上游引物5’‑AAGAAGCACCGGCCAACTAC‑3’,下游引物5’‑ TCGCTCCTCAGCGTCAGTTA ‑3’;检测基因Rv3519的上游引物5’‑ GTTCATCCATCATCTGCC ‑3’,下游引物5’‑ AAGTCCGCCATGATCTTC ‑3’;荧光定量PCR检测。
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