[发明专利]一种卵黄高磷蛋白磷酸肽富集方法

摘要

本发明公开了一种卵黄高磷蛋白磷酸肽富集方法，属于提取纯化分离领域。本发明方法是以介孔/大孔二氧化钛(TiO2)为吸附材料富集卵黄高磷蛋白磷酸肽，此法得到的卵黄高磷蛋白磷酸肽的N/P为4.5。介孔/大孔TiO2不仅可以利用金属氧化物TiO2对磷酸基团的特异性亲和作用，而且介孔‑大孔结构的高比表面积和良好的孔道结构提供了更多的活性结合位点。当富集条件为：pH为2.5‑4，初始多肽浓度为12‑20mg/mL，吸附时间为5‑20min，此时得到的PPPs的纯度为4.3‑4.8，对应的吸附量为42‑53mg/mL。本发明的方法不仅操作简单，而且快速有效，有利于在工业化生产中应用。

主权项

1.一种卵黄高磷蛋白磷酸肽富集方法，其特征在于，所述方法是先将蛋黄蛋白粉进行部分脱磷处理，然后使用胰蛋白酶对部分脱磷后的蛋黄蛋白粉进行酶解，得到粗多肽；再采用介孔/大孔TiO2材料对粗多肽进行吸附，洗脱，即得到卵黄高磷蛋白磷酸肽；所述介孔/大孔TiO2的制备包括以下步骤：柠檬酸溶于乙醇中，搅拌，然后加入氨水溶液，继续搅拌，之后将钛酸四正丁酯在搅拌状态下，逐滴加入上述溶液，搅拌，然后静置；然后依次用水和无水乙醇对沉淀进行清洗，将洗涤后的材料干燥，最后将上述材料置于马弗炉中进行煅烧；其中每0.3g的柠檬酸，加入18mL质量浓度为25％‑28％的氨水和5mL钛酸四正丁酯。