[发明专利]牙龈卟啉单胞菌RgpA基因敲除突变株的制备方法有效
| 申请号： | 201510358543.5 | 申请日： | 2015-06-25 |
| 公开（公告）号： | CN104962575B | 公开（公告）日： | 2018-09-07 |
| 发明（设计）人： | 孙卫斌;张瑞;杨洁 | 申请（专利权）人： | 南京市口腔医院 |
| 主分类号： | C12N15/74 | 分类号： | C12N15/74 |
| 代理公司： | 南京汇盛专利商标事务所(普通合伙) 32238 | 代理人： | 吴静安;袁静 |
| 地址： | 210012 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供牙龈卟啉单胞菌RgpA基因敲除突变株的制备方法，本发明涉及口腔医学领域。所述方法包括如下步骤：扩增牙龈卟啉单胞菌RgpA基因的上、下游同源臂；扩增红霉素抗性基因片段；构建两端为所述RgpA基因的上、下游同源臂，中间为红霉素抗性基因片段的同源重组片段；将同源重组片段转化入牙龈卟啉单胞菌内，进行同源重组，采用红霉素抗性平板筛选，获得牙龈卟啉单胞菌RgpA基因敲除突变株。本发明牙龈卟啉单胞菌RgpA基因敲除突变株的制备方法，操作简便灵活，无需繁琐的酶切连接和筛选，对突变位点的选择无特异性要求，重组效率高。 | ||
| 搜索关键词： | 牙龈 卟啉 单胞菌 rgpa 基因 突变 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.牙龈卟啉单胞菌RgpA基因敲除突变株的制备方法，其特征在于包括如下步骤：（1）扩增牙龈卟啉单胞菌RgpA基因的上、下游同源臂；（2）扩增红霉素抗性基因片段；（3）构建两端为所述RgpA基因的上、下游同源臂，中间为红霉素抗性基因片段的同源重组片段；（4）将同源重组片段转化入牙龈卟啉单胞菌内，进行同源重组，采用红霉素抗性平板筛选，获得牙龈卟啉单胞菌RgpA基因敲除突变株；所述上游同源臂的序列如SEQ ID NO:1所示，所述下游同源臂的序列如SEQ ID NO:2所示。
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