[发明专利]用于确定花粉群的花粉活力和/或成熟度的方法

摘要

本发明涉及用于确定花粉群的花粉活力和/或成熟度的方法，所述方法包括：从花中机械移取花粉粒；在导电的缓冲液中重悬花粉粒，用于使植物细胞保持活性；将花粉悬浮液通过具有适合于微流体设备的孔径的适当的过滤器，所述微流体设备适配于实施阻抗式流式细胞术(IFC)；将过滤的悬浮液通过微流体设备并测量花粉粒的阻抗；存储测量的各花粉的阻抗值以及测量频率，所述阻抗值具有幅值及其相关相位角；计数过滤的悬浮液中的花粉粒；以及根据振幅和/或相位值，通过设定合适的门控以鉴别花粉粒，并确定分析的花粉群的活力比或成熟度。本发明的优点是植物细胞不必染色用于活力分析，该方法是非侵入式的，并且可以在短时间范围内实时且原地分析大量细胞。

主权项

1.用于确定花粉群的花粉活力和/或成熟度的方法，包括：从花中机械移取未成熟或成熟的花粉粒；在缓冲液中重悬花粉粒，所述缓冲液具有使花粉在制备和测量期间保持存活，以及为通过使用阻抗式流式细胞术(IFC)的测量提供充分导电性的能力；将细胞悬浮液通过具有适合于微流体设备的孔径的适当的过滤器，所述微流体设备适配于实施阻抗式流式细胞术(IFC)；将过滤的悬浮液通过针对各个花粉类型校准的微流体设备，并以预定频率测量花粉粒的阻抗；存储测量的各花粉粒的阻抗值以及测量频率，所述阻抗值具有幅值及其相关相位角；计数过滤的悬浮液中的花粉粒；以及根据振幅和/或相位值，通过手工或自动设定合适的门控以鉴别花粉粒，并确定分析的花粉群的活性比非活性的比率或成熟度，还包括通过以下鉴定植物细胞是活性还是非活性的：将存储的具有幅值和相位角值的阻抗值排列在x‑y‑矩阵中；确定具有较低相位角和较高相位角的数据组之间的门控；计数不同数据组的花粉粒阻抗值；计算阻抗值的相位角低于门控的花粉量和阻抗值的相位角高于门控的花粉量之间的比率；将所述比率与包含各花粉数据的数据库的各比率比较，用于确定花粉的活力是否足以用于给定的特定目的；以及展示该分析群体的结果；或还包括通过以下鉴定成熟度：确定幅值和/或角度值，作为测量频率的函数；将所述幅值和/或角度值与包含各花粉的数据的数据库的各值比较；将所述植物细胞鉴定为属于特定的发育阶段；以及展示该分析群体的结果。