[发明专利]一种甘蔗无载体框架转基因方法有效
| 申请号： | 201510374031.8 | 申请日： | 2015-06-29 |
| 公开（公告）号： | CN105039389B | 公开（公告）日： | 2020-07-28 |
| 发明（设计）人： | 王继华;曹干;张木清;王丽 | 申请（专利权）人： | 广东省农业科学院作物研究所 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12N15/87;A01H5/00;A01H6/46 |
| 代理公司： | 广州市越秀区哲力专利商标事务所(普通合伙) 44288 | 代理人： | 赵赛 |
| 地址： | 510640 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提供一种甘蔗无载体框架转基因方法，具体涉及一种甘蔗无载体框架转基因方法，包括以下步骤：1)提取含有Bar基因的质粒；2)制备无载体框架的Bar基因表达盒；3)基因枪转化：将步骤2)获得的Bar基因表达盒制备DNA微弹，用装载有DNA微弹的基因枪轰击甘蔗愈伤组织，对轰击后的愈伤组织进行培养；4)抗性筛选，再生培养。本发明直接将甘蔗愈伤组织作为受体材料，通过基因枪介导Bar基因表达盒来转化甘蔗愈伤组织，培养后进行抗性筛选和再生，获得含有抗除草剂功能的转基因甘蔗，基因转化率高，能够大大降低转基因成本，节省时间。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 甘蔗 载体 框架 转基因 方法 | ||
【主权项】：
一种甘蔗无载体框架转基因方法，包括以下步骤：1)质粒提取：对含有bar基因的大肠杆菌单菌落进行培养，提取含有bar基因的质粒；2)Bar基因表达盒的制备：采用核酸内切酶Hind Ⅲ和Xho Ⅰ酶切步骤1)获得的含有bar基因的质粒，得酶切产物；将酶切产物进行电泳纯化，收集含有启动子、bar基因和终止子的Bar基因表达盒；3)基因枪转化：将步骤2)获得的Bar基因表达盒制备DNA微弹，用装载有DNA微弹的基因枪轰击甘蔗愈伤组织，对轰击后的愈伤组织进行培养；4)抗性筛选：使用除草剂进行抗性筛选，再生培养，得到转基因植株。
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