[发明专利]用动态轴向压缩柱制备金银花单体的方法

摘要

本发明属于医药技术领域，公开了一种用动态轴向压缩柱从金银花中分离纯化新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、断氧化马钱子苷四种单体的方法，其包括流动相配制、溶解过滤、动态轴向压缩柱填装、系统平衡、洗脱分离、浓缩等步骤。本发明在一次分离纯化过程中，可以同时制备四种单体，包括新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、断氧马钱子苷，通过高效液相色谱法检测，其纯度均在90%以上。本发明的方法操作简单，生产周期短，制备效率高，产品质量可控，且所用有机试剂均可以回收再用，是一种高效、环保、适用性强的工业制备金银花单体的分离纯化方法。

主权项

1.用动态轴向压缩柱制备金银花单体的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)提取溶剂的配制：用乙醇和水配制30％‑95％的乙醇‑水混合溶液作为样品提取溶剂；(2)样品的提取浓缩：金银花药材，用步骤(1)配制的提取溶剂超声、回流或微波提取，过滤，减压浓缩得到样品浓缩液；(3)浓缩液的萃取：将步骤(2)得到的样品浓缩液用1～3倍量乙酸乙酯萃取2～3次，萃取物浓缩至干，得到乙酸乙酯层浸膏；(4)流动相配制：用弱极性溶剂配制流动相，作为样品洗脱液，所述的弱极性溶剂为无水乙醇，其流动相中无水乙醇与水的体积比例为12％‑50％；(5)样品溶液稀释过滤：将步骤(3)得到的乙酸乙酯浸膏，用步骤(4)配制的流动相稀释至浓度为10～50mg/ml，过滤作为样品；(6)动态轴向压缩柱填装：将色谱填料用步骤(4)配制的流动相匀浆得到匀浆液，将匀浆液送入动态轴向压缩柱，排出流动相后压实色谱填料，完成动态轴向压缩柱的填装，所述的色谱柱填料为粒径为5‑20μm的C18填料；(7)系统平衡：用步骤(4)配制的流动相冲洗步骤(6)填装的动态轴向压缩柱，持续15‑20分钟，直到色谱仪检测的色谱基线平稳，至平衡状态，动态轴向压缩柱的填料高度为200‑300mm；(8)洗脱分离：将步骤(5)得到的样品注入步骤(7)平衡后的动态轴向压缩柱，用紫外检测器在线检测样品分离情况，根据保留时间和色谱峰的高度确定所制备金银花单体的收集起止时间点；(9)浓缩：将步骤(8)收集得到的每种单体溶液分别减压浓缩，除去溶剂，得到高纯度的单体；所述的单体为新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、断氧化马钱子苷。