[发明专利]一种利用固液结合发酵工艺生产双歧杆菌的方法

摘要

本发明提供一种利用固液结合发酵工艺生产双歧杆菌的方法，其具体流程为：原种液体培养、一级菌种培养、二级菌种培养、三级菌种培养、固体培养。本发明将液态培养和固态培养相结合，将最后的液态培养改成液固结合，使菌种培养效果更好。最后一步培养为关键的培养步骤，现今的培养都是用液体培养，当培养发生问题时，需要对整体进行处理，造成原料浪费，导致培养成本过高，本发明经最后一步改为固体培养，当出现问题时，可以直接对问题部分进行剔除，避免其他培养基和菌种的浪费，降低的培养成本，提高了培养成功率。

主权项

一种利用固液结合发酵工艺生产双歧杆菌的方法，其具体流程为：原种液体培养    将双歧杆菌菌种放入培养基中，所述培养基由植物蛋白胨0.55%‑0.78%、胰胨0.25%‑0.48%、酵母浸膏0.15%‑0.28%、葡萄糖0.35%‑0.58%、盐溶液0.15%‑0.28%、蒸馏水95%‑98%组成，然后将放入菌种的培养基放在通风处进行培养；一级菌种培养    将土豆、麸皮放入蒸馏水中进行蒸煮，然后提取溶液，将溶液中加入植物蛋白质胨、牛肉膏、蔗糖、盐溶液，再将菌种放入培养液中，将溶液放置到通风处进行发酵培养；二级菌种培养    制取一级培养液，但培养皿换为无色透明试剂瓶，将试剂瓶继续拧灭菌，灭菌后放入培养液，然后接种一级菌种10%后，每隔5小时晃动1分钟，培养24‑96小时，当细胞达到1.0亿CFU\g时终止培养，室温下保存备用；三级菌种培养     取植物蛋白胨、海参蒸煮液、玉米浆、酵母膏、肉牛浸膏、番茄培养基放入蒸馏水中进行溶解，以此作为培养基，然后进行二级菌种接种，接种20%后静置，当细胞达到1.8亿CFU\g时终止培养，室温下保存备用；(4)固体培养 利用玉米粉、大米粉、大豆粉、全脂乳粉、海参蒸煮液、玉米浆、酵母膏、肉牛浸膏进行固体培养基制作，然后对培养基进行冷却灭菌，然后将三级液态菌种浸入到固体培养内，然后将浸入菌种的固体培养基放入培养房内进行静置发酵培养，当细胞达到5亿CFU\g时终止培养。