[发明专利]一种用于检测溶菌酶的电化学生物传感器及其制备方法有效
申请号: | 201510383185.3 | 申请日: | 2015-07-02 |
公开(公告)号: | CN104990966A | 公开(公告)日: | 2015-10-21 |
发明(设计)人: | 夏建飞;曹喜玥;王宗花;杨敏;张菲菲 | 申请(专利权)人: | 青岛大学 |
主分类号: | G01N27/26 | 分类号: | G01N27/26 |
代理公司: | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人: | 赵妍 |
地址: | 266071 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明公开了一种用于检测溶菌酶的电化学生物传感器的制备方法,包括以下步骤:(1)设计一条报告探针DNA链S1;(2)将金电极预处理;(3)S1在缓冲液中打开二硫键,后将溶菌酶适体S2加入与S1形成双链DNA;(4)将处理好的金电极浸在双链DNA溶液中,将双链DNA修饰到金电极表面。本发明还公开了一种利用上述方法制备的电化学生物传感器以及该传感器在检测溶菌酶中的应用。将本发明得到的电极在三氯化六氨合钌检测液中浸泡,然后与甘汞参比电极和铂丝对比电极构成三电极系统,进行SWV检测。本发明首次将双电化学信号放大的策略结合免标记策略应用到溶菌酶的检测中来,实现高灵敏度地对溶菌酶进行检测。 | ||
搜索关键词: | 一种 用于 检测 溶菌酶 电化学 生物 传感器 及其 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种用于检测溶菌酶的电化学生物传感器的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)设计一条报告探针DNA链S1,所述DNA链S1与溶菌酶适体S2互补配对;S1链的3’端修饰有二茂铁标记物,S1链的5’端硫醇化;其中,报告探针S1的DNA链序列为:5’‑SH‑C6‑GTGCAGAGCTAAGTAACTCTGCAC‑Fc‑3’;适体S2的DNA链序列为:5’‑ATC AGG GCT AAA GAG TGC AGA GTT ACT TAG‑3’;(2)将金电极打磨抛光成镜面,再经二次蒸馏水超声清洗,干燥,得处理后的金电极;(3)报告探针S1在含有三(2‑羧乙基)膦的缓冲液中打开二硫键,后将溶菌酶适体S2加入与S1形成双链DNA;(4)将步骤(2)处理好的金电极浸在步骤(3)得到双链DNA溶液中,将双链DNA修饰到金电极表面,得电化学生物传感器。
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