[发明专利]甘肃贝母试管小鳞茎培育的方法

摘要

本发明公开了一种甘肃贝母试管小鳞茎培育的方法，以解决现有贝母培养方法存在的诱导率低、培养周期长、步骤繁琐的问题。它包括以下步骤选择外植体将贝母掰成鳞瓣和鳞心，对外植体消毒，然后对外植体进行诱导，具体诱导方法是，将灭菌后的外植体接种于诱导培养基中，在温度为16‑25℃，黑暗条件下培养，在鳞心或鳞瓣的基部诱导出原球茎；对于鳞心，诱导培养基包括如下配方1/2MS基本培养液、蔗糖50‑80g/L、活性炭2‑5g/L、琼脂5‑6g/L、精氨酸500‑2000mg/L、玉米素（ZT）1‑5mg/L、油菜素内酯（BR）0.1‑0.5mg/L、茉莉酸甲酯（MEJA）1‑5mg/L；对于鳞瓣，激素配方不同于鳞心，培养基的pH值为5.5‑6.5。本发明方法具有繁殖速度快、培养周期短、扩繁率高、方便移栽、既可作种鳞茎栽培、又可作商品使用的特点。

主权项

一种甘肃贝母试管小鳞茎培育的方法，其特征在于包括以下步骤：选择外植体将贝母掰成鳞瓣和鳞心，对外植体消毒，然后对外植体进行诱导，具体诱导方法是，将灭菌后的外植体接种于诱导培养基中，在温度为16‑25℃，黑暗条件下培养，在鳞心或鳞瓣的基部诱导出原球茎；对于鳞心，诱导培养基由如下配方组成: 1/2MS基本培养液、蔗糖50‑80g/L、活性炭2‑5g/L、琼脂5‑6g/L、精氨酸500‑2000mg/L、玉米素1‑5mg/L、油菜素内酯0.1‑0.5mg/L、茉莉酸甲酯1‑5mg/L；对于鳞瓣，诱导培养基由如下配方组成: 1/2MS基本培养液、蔗糖50‑80g/L、活性炭2‑5g/L、琼脂5‑6g/L、精氨酸500‑2000mg/L、玉米素1‑5mg/L、油菜素内酯0.1‑0.5mg/L、茉莉酸甲酯1‑5mg/L、吲哚乙酸2‑4mg/L；培养基的pH值为5.5‑6.5；外植体的选择步骤是于当年6月前后开花期采挖新鲜的开花贝母，在‑2℃—4℃低温条件下贮藏；外植体消毒步骤采用二次消毒法，外植体表面消毒前先使用内吸性杀菌剂或0.3%的升汞浸泡20‑30min，期间不断震荡摇晃，用灭菌蒸馏水冲洗干净，间隔2‑3天，再用0.3%的升汞浸泡20min，期间不断震荡摇晃，用灭菌蒸馏水冲洗干净；内吸性杀菌剂选自嘧菌酯、恶霉灵和农用链霉素的混合物质；还包括原球茎的生长与膨大步骤，将诱导出的原球茎接种于下列生长膨大培养基中，在温度为13‑20℃，黑暗条件下培养，原球茎逐渐生长膨大；生长膨大培养基配方见下：MS基本培养液、蔗糖50‑80g/L、活性炭2‑5g/L、琼脂5‑6g/L、酸水解酪蛋白500‑2000mg/L、酵母提取物500‑2000mg/L、水杨酸30‑50mg/L、油菜素内酯0.1‑0.5mg/L和吲哚乙酸2‑4mg/L；培养基中pH值为5.5‑6.5。