[发明专利]一种复合酶制备黑豆抗氧化多肽粉的方法

摘要

一种复合酶制备黑豆抗氧化多肽粉的方法，包括以下步骤：第一步，黑豆蛋白质的分离:先制备黑豆粉，再将黑豆粉脱脂，再对脱脂黑豆粉酶解，最后离心冷冻干燥得黑豆蛋白粉；第二步，黑豆多肽粉的制备。本发明复合酶法制备黑豆抗氧化多肽粉提高了蛋白提取效率，酶用量少，降低了成本，所得黑豆抗氧化多肽粉食用更安全更营养，值得推广。

主权项

一种复合酶制备黑豆抗氧化多肽粉的方法，其特征在于，包括以下步骤：    第一步，黑豆蛋白质的分离步骤1，挑选黑豆，除去杂质后置于4‑10℃水中浸泡6‑10h去除黑豆皮，置于烘箱中50‑60℃下烘5‑6h，使其含水量低于10%，再将烘干后的去皮黑豆研磨过筛得黑豆粉；步骤2，将黑豆粉与脱脂溶剂按照质量体积比为1:10‑15 g/mL混合后于40‑50℃下搅拌，倾去上清液，再加入石油醚继续搅拌，静置5h以上，倾去上清液，将沉淀物风干得脱脂黑豆粉；步骤3，取脱脂黑豆粉按照1:8‑10g/mL固液比加入蒸馏水搅拌，用乳酸调pH至4.5‑5.5，再加入0.5‑0.9%黑豆粉重量的纤维素酶、0.5‑0.7%的半纤维素酶和0.1‑0.4%的果胶酶，搅拌后35‑45℃下震荡卵育30‑50min，再升温至50‑55℃，再加入1.0%黑豆粉重量的碱性内切蛋白酶，5%的碳酸钠溶液调pH至7.5‑8.0，继续震荡1‑2h，加热至85‑95℃，并保温10‑20min，4000‑5000rpm离心15‑20min，收集上清液，离心后的沉淀按照脱脂黑豆粉固液比1:3‑5g/mL的量加入去离子水，再按照第一次酶量的30%依次加入纤维素酶、果胶酶和碱性内切蛋白酶，离心得上清液，并入第一次离心上清液混合；步骤4，用乳酸调节上清液的pH至5.0，离心收集沉淀，再调节上清液pH至4.7静置30min，离心收集沉淀，最后一次调节pH至4.4，静置后离心收集沉淀，混合三次沉淀，用去离子水洗涤后离心得沉淀物，将沉淀物4℃下预冷处理后，冷冻干燥得黑豆蛋白粉；    第二步，黑豆多肽粉的制备    取第一步所得的黑豆蛋白粉加入4‑10℃水中，使得黑豆蛋白液质量浓度为3‑6%，搅拌后调pH值为7.5‑8.5，加热至90‑95℃，灭菌15‑20min，再降温至50‑55℃，依次经过碱性蛋白酶水解、风味蛋白酶水解和中性蛋白酶水解，调节pH值至4.5，将黑豆蛋白液经微滤膜预处理，再超滤分离纯化，调节pH至4.6，按照活性炭：黑豆蛋白液为0.15‑0.3g/L的量添加活性炭，45‑55℃震荡1‑2h后静置并离心，收集上清液，浓缩至浓度为25‑50%后在4℃下进行遇冷处理，再冷冻干燥得黑豆抗氧化多肽粉产品。