[发明专利]一种农杆菌介导的荻种子愈伤组织转化方法及应用在审
| 申请号： | 201510401698.2 | 申请日： | 2015-07-08 |
| 公开（公告）号： | CN105039396A | 公开（公告）日： | 2015-11-11 |
| 发明（设计）人： | 郭海朋;蒋德安;洪春桃;郑炳松 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12N15/84 | 分类号： | C12N15/84;A01H5/00 |
| 代理公司： | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人： | 黄平英 |
| 地址： | 310027 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种农杆菌介导的荻种子愈伤组织转化方法及应用，以荻成熟种子为外植体，诱导愈伤组织，通过农杆菌介导的遗传转化方法，利用hptII基因作为筛选基因，以潮霉素作为选择剂，对转化后的愈伤组织在相应的筛选压力培养基上进行两次筛选，分化出的植株经PCR检测，证实外源基因已整合到荻基因组中，获得了转基因荻植株。本发明首次报道了采用农杆菌介导荻种子愈伤转化的方法。本发明为荻遗传转化创新种质资源提供了新的技术平台。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 杆菌 种子 组织 转化 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种农杆菌介导的荻种子愈伤组织转化方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)选取荻成熟种子，消毒、清洗后依次进行愈伤组织诱导、继代培养；(2)将继代培养后的胚性愈伤组织置于含有农杆菌菌液的侵染液中侵染，所述农杆菌菌液带有表达载体；侵染后的胚性愈伤组织在共培养基上进行共培养；(3)取共培养后的愈伤组织依次经无菌水和含羧卞青霉素的无菌水清洗，然后移至含有羧卞青霉素和潮霉素的选择培养基上进行筛选；(4)将筛选得到的抗性愈伤组织移至分化培养基上，进行分化培养，诱导出不定芽；(5)将分化出的不定芽移至生根培养基上，培养成完整植株。
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