[发明专利]能抑制猪流感病毒的shRNA转基因重组质粒及其应用有效

专利信息
申请号: 201510412627.2 申请日: 2015-07-14
公开(公告)号: CN105002179B 公开(公告)日: 2018-07-06
发明(设计)人: 孟庆文;王伟;陈洪岩 申请(专利权)人: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
主分类号: C12N15/113 分类号: C12N15/113;C12N15/79;C12N5/10;A61K48/00;A61P31/16
代理公司: 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 代理人: 王文君
地址: 150001 黑龙*** 国省代码: 黑龙江;23
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摘要: 发明提供一种能抑制猪流感病毒的shRNA转基因重组质粒,该质粒含有四个shRNA表达基因,能同时编码四种分别靶向流感病毒PA、PB1、PB2、NP基因保守区域的特异shRNA。该质粒适用于多种转基因技术。使用慢病毒载体将该质粒转入体外培育的MDCK细胞后,经攻毒实验证明,筛选得到的转基因细胞系具有抵抗不同亚型流感病毒感染的能力。将该质粒通过静脉与肌肉注射入4周龄仔猪,然后用H3N2亚型猪流感病毒感染,发现经血液注射组具有更强的抑制流感病毒的复制。为RNAi应用于猪流感病毒的研究以及猪流感的防治积累了必要的实验数据,为转基因猪抗流感研究奠定基础。
搜索关键词: 质粒 猪流感病毒 重组质粒 转基因 猪流感病毒感染 亚型流感病毒 抑制流感病毒 转基因细胞系 流感病毒PA 慢病毒载体 转基因技术 保守区域 表达基因 肌肉注射 实验数据 体外培育 血液注射 转基因猪 抗流感 猪流感 仔猪 靶向 静脉 应用 复制 筛选 转入 抵抗 感染 研究 防治 积累 发现
【主权项】:
1.一种能抑制猪流感病毒复制与感染的shRNA,其特征在于,所述shRNA是以猪流感病毒PB2,以及PA、PB1和NP为靶基因,编码所述shRNA的核苷酸序列为:
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