[发明专利]一种羟乙基壳聚糖原位水凝胶的制备方法

摘要

本发明属于生物医学技术领域，具体涉及一种羟乙基壳聚糖原位水凝胶的制备方法，首先将高碘酸钠粉末溶于去离子水中，制得高碘酸钠水溶液，然后搅拌海藻酸钠水溶液与高碘酸钠水溶液形成混合液使其进行氧化反应后加入乙二醇终止反应，抽滤混合液并用无水乙醇脱水沉淀后低温真空干燥制得氧化海藻酸钠粗品，再用蒸馏水溶解成氧化海藻酸钠粗品水溶液，将其透析完全后进行离心取上清液冷冻干燥制得氧化海藻酸钠，最后将羟乙基壳聚糖与氧化海藻酸钠混合经双联注射器交联反应挤推至试管中得羟乙基壳聚糖原位水凝胶，用于角膜缘干细胞的快速包封移植；其制备工艺简单，原理安全可靠，制备成本低，产品质量好，使用安全，卫生，治疗环境友好。

主权项

一种羟乙基壳聚糖原位水凝胶的制备方法，其特征在于制备工艺包括高碘酸钠水溶液制备、氧化海藻酸钠制备和羟乙基壳聚糖原位水凝胶制备三个步骤：(1)、高碘酸钠水溶液制备：常温下称取高碘酸钠粉末1g并溶于50ml去离子水中，制得质量百分比浓度为2％的高碘酸钠水溶液；(2)、氧化海藻酸钠制备：在质量百分比浓度为2％的海藻酸钠水溶液中按海藻酸钠与高碘酸钠反应的摩尔比为10:1加入步骤(1)制备的高碘酸钠水溶液，在室温下搅拌海藻酸钠水溶液和高碘酸钠水溶液混合形成的混合液使其进行氧化反应，24h后在混合液中加入乙二醇100ul终止氧化反应0.5h，抽滤混合液并用无水乙醇脱水沉淀得到白色固形物，低温真空干燥白色固形物后制得氧化海藻酸钠粗品，再将氧化海藻酸钠粗品用蒸馏水溶解成质量百分比浓度为2％的氧化海藻酸钠粗品水溶液，在4℃温度下将氧化海藻酸钠粗品水溶液置于透析袋中透析，每6h换1次蒸馏水，用电导率仪测定氧化海藻酸钠粗品水溶液透析完全后进行离心后取上清液冷冻干燥制得氧化度为10％的氧化海藻酸钠；(3)、羟乙基壳聚糖原位水凝胶制备：将质量百分比浓度为2％羟乙基壳聚糖与步骤(2)制得的氧化海藻酸钠按质量比8:1等体积混合后经过双联注射器交联反应挤推至试管中得羟乙基壳聚糖原位水凝胶。