[发明专利]共轭γ-亚麻酸异构体的非水酶学合成方法有效

专利信息
申请号: 201510423374.9 申请日: 2015-07-20
公开(公告)号: CN105039438B 公开(公告)日: 2018-05-22
发明(设计)人: 刘晓华;魏华 申请(专利权)人: 南昌大学
主分类号: C12P7/64 分类号: C12P7/64;C12R1/245
代理公司: 南昌新天下专利商标代理有限公司 36115 代理人: 施秀瑾
地址: 330031 江西省*** 国省代码: 江西;36
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摘要: 共轭γ‑亚麻酸异构体的非水酶学合成方法,包括:(1)每克干酪乳杆菌CGMCC 1.574中加4mL 50mM、pH6.8磷酸盐缓冲液、5mg/mL溶菌酶和2mM乙二胺四乙酸钠,37℃处理20min;超声功率200W、每超声处理5s停歇30s、超声处理2次,离心得透性化菌体;(2)用50mM、pH5.8磷酸盐缓冲液洗,收集菌体,将每克透性化湿菌体重悬于20mL50mM、pH5.8的磷酸盐缓冲液中,加入菌悬液体积0.5‑2.0%吐温‑80,混匀,4‑40℃处理2‑6h,离心收集菌体,冷冻干燥得包衣菌体;(3)将每克包衣菌体加入到600mL正己烷中,搅拌均匀,加入正己烷体积0.1‑0.3%γ‑亚麻酸,4‑40℃反应1‑12h;(4)离心分离包衣菌体,回收正己烷,产物为c6,c9,t11‑共轭γ‑亚麻酸异构体。本发明反应时间短,包衣菌体可重复使用多次,产量显著提高,无环境污染,生产成本显著降低。
搜索关键词: 共轭 亚麻 酸异构体 非水酶学 合成 方法
【主权项】:
1.共轭γ-亚麻酸异构体的非水酶学合成方法,其特征是包括以下步骤:(1)收集处于对数生长期的干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)CGMCC 1.574菌体,每克湿菌体中加入4mL 50mM、pH6.8磷酸盐缓冲液、5mg/mL溶菌酶和2mM乙二胺四乙酸钠,37℃处理20min,再经超声波处理,超声功率200W,每超声处理5s停歇30s,超声处理2次,离心得到透性化菌体;(2)透性化菌体用50mM、pH5.8的磷酸盐缓冲液洗涤后,离心收集菌体,按每克透性化湿菌体重悬于20mL50mM、pH5.8的磷酸盐缓冲液中计,将透性化湿菌体重悬于磷酸盐缓冲液中,加入菌悬液体积百分比0.5-2.0%的吐温-80,混合均匀,于4-40℃处理2-6h,离心收集菌体,将菌体冷冻干燥后得到包衣菌体;(3)按每克包衣菌体加入到600mL正己烷中计,将包衣菌体加入到正己烷中,搅拌均匀,加入正己烷体积百分比0.1-0.3%的γ-亚麻酸,在4-40℃下反应1-12h;(4)离心分离包衣菌体,将正己烷溶液进行减压蒸馏,回收正己烷,产物为c6,c9,t11-共轭γ-亚麻酸异构体。
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