[发明专利]包衣菌体在有机介质中生物合成共轭γ‑亚麻酸异构体的方法有效
| 申请号： | 201510424009.X | 申请日： | 2015-07-20 |
| 公开（公告）号： | CN105112461B | 公开（公告）日： | 2018-04-17 |
| 发明（设计）人： | 刘晓华;陈红兵 | 申请（专利权）人： | 南昌大学 |
| 主分类号： | C12P7/64 | 分类号： | C12P7/64;C12R1/245 |
| 代理公司： | 南昌新天下专利商标代理有限公司36115 | 代理人： | 施秀瑾 |
| 地址： | 330031 江西省*** | 国省代码： | 江西;36 |
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| 摘要： | 包衣菌体在有机介质中生物合成共轭γ‑亚麻酸异构体的方法，包括以下步骤（1）将每克干酪乳杆菌CGMCC 1.574菌体重悬于5mL透性化处理液中，37℃处理20min，离心收集透性化菌体；（2）用50mM、pH5.8的磷酸盐缓冲液洗涤后，离心收集菌体，将每克透性化湿菌体重悬于20mL50mM、pH5.8的磷酸盐缓冲液中，加入菌悬液体积0.5‑2.0%的吐温‑20混合均匀，4‑40℃处理2‑6h，离心收集菌体，冷冻干燥后得到包衣菌体；（3）将每克包衣菌体加入到600mL正己烷中，搅拌均匀，加入正己烷体积0.1‑0.3%的γ‑亚麻酸，4‑40℃下反应1‑12h；（4）离心分离包衣菌体，回收正己烷，产物为c6,c9,t11‑共轭γ‑亚麻酸异构体。本发明反应时间短，包衣菌体可重复使用多次，产量得到了显著提高，无环境污染，显著降低生产成本。 | ||
| 搜索关键词： | 包衣 菌体 有机 介质 生物 合成 共轭 亚麻 酸异构体 方法 | ||
【主权项】：
包衣菌体在有机介质中生物合成共轭γ‑亚麻酸异构体的方法，其特征是包括以下步骤：（1）收集处于对数生长期的干酪乳杆菌（Lactobacillus casei）CGMCC 1.574菌体，按每克湿菌体重悬于5mL透性化处理液中计，将湿菌体重悬于透性化处理液中，重悬菌体经37℃处理20min，离心收集透性化菌体；（2）透性化菌体用50mM、pH5.8的磷酸盐缓冲液洗涤后，离心收集菌体，按每克透性化湿菌体重悬于20mL50mM、pH5.8的磷酸盐缓冲液中计，将透性化湿菌体重悬于磷酸盐缓冲液中，加入菌悬液体积百分比0.5‑2.0%的吐温‑20混合均匀，于4‑40℃处理2‑6h，离心收集菌体，将菌体冷冻干燥后得到包衣菌体；（3）按每克冻干包衣菌体加入到600mL正己烷中计，将包衣菌体加入到正己烷中，搅拌均匀，加入正己烷体积百分比0.1‑0.3%的γ‑亚麻酸，在4‑40℃下反应1‑12h；（4）离心分离包衣菌体，将正己烷溶液进行减压蒸馏，回收正己烷，产物为c6,c9,t11‑共轭γ‑亚麻酸异构体；步骤（1）所述的透性化处理液为体积百分比0.5‑3.0%的曲拉通X‑100，5‑50μM的γ‑亚麻酸，20‑200mM、pH5.8的磷酸盐缓冲液。
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