[发明专利]微小体型鞘翅目昆虫触角的快速分离方法

摘要

本发明公开了微小体型鞘翅目昆虫触角的快速分离方法，是将昆虫头部切下放入置于灭菌后的离心管内，将离心管浸入液氮中，然后在旋涡震荡器上震荡使昆虫触角全部脱离，向离心管内加入预冷的丙酮溶液，将昆虫触角全部冲洗出来置于灭菌滤纸上过滤，再迅速集中在体视显微镜下镜检，后收集于去RNA酶离心管中备用提取RNA、DNA、蛋白质等。本发明克服了传统昆虫触角分离方法所存在的局限，能使微小体型鞘翅目昆虫的触角和头部在一个相对密闭的环境中快速分离，在短时间内能够收集到大量有生物活性的昆虫触角，抽提得到的昆虫触角RNA能达到要求的纯度和浓度，而且RNA其它质量指标均很好，本发明有效的提高了昆虫解剖学领域的科研效率和精确性。

主权项

微小体型鞘翅目昆虫触角的快速分离方法，其特征在于所采用的技术方案如下：a.用手术刀将微小体型鞘翅目昆虫头部快速切下，迅速放入置于冰上的灭菌后的离心管内；b.待离心管内放入所需数量的昆虫头部后，将离心管底部浸入液氮中，浸入时间为15s；c.然后迅速将离心管放在旋涡震荡器上震荡5～10s，震荡频率为500～3000r/min；d.重复步骤b与步骤c程序2～8次，随时取出昆虫头部在体视显微镜下观察，使其达到昆虫触角全部脱离而其它组织不脱落；e.将昆虫触角全部脱落的昆虫头部从离心管内倒出，可看到分离出的昆虫触角都黏附在离心管内壁上；f.向离心管内加入‑20℃预冷的丙酮溶液，将离心管内壁上的昆虫触角全部冲洗出来，置于9cm灭菌滤纸上进行过滤；g.待丙酮溶液过滤完后，迅速将滤纸上的昆虫触角集中在体视显微镜下镜检，将非昆虫触角的其它虫体组织用尖头镊子分离剔出；h.将纯净的昆虫触角收集于去RNA酶离心管中，备用提取RNA、DNA、蛋白质等。