[发明专利]一类荧光纳米球及其制备方法

摘要

本发明涉及一类荧光纳米球及其制备方法，属于生物检测领域。为SiO2荧光纳米球、PAM荧光纳米球或SiO2@PAM荧光纳米球，所述SiO2荧光纳米球为粒径80‑150nm的SiO2表面通过酰胺键偶联荧光分子，所述PAM荧光纳米球为粒径70‑150nm的聚丙烯酰胺表面通过酰胺键偶联荧光分子，所述SiO2@PAM荧光纳米球以SiO2为内核，外层为聚丙烯酰胺偶联荧光分子，其粒径为100‑200nm，外层厚度为5‑20nm。本发明的荧光纳米球，可以与不同的荧光分子偶联，从而可以对各个环节进行综合评价，更好的用于生物检测。

主权项

一种SiO2@PAM荧光纳米球的制备方法， 所述SiO2@PAM荧光纳米球以SiO2为内核，外层为聚丙烯酰胺偶联荧光分子，其粒径为100‑200nm，外层厚度为5‑20nm；所述荧光分子为罗丹明B，罗丹明X，或荧光素；荧光分子的质量含量为0.1%‑3%；其特征在于，包括如下步骤：(1)制备SiO2纳米小球以无水乙醇为共溶剂，氨水为催化剂，将超纯水、氨水和无水乙醇至于圆底烧瓶中，磁力搅拌混合均匀，另将TEOS 与无水乙醇混合物置于烧杯中，搅拌均匀后迅速倒入烧瓶中，室温搅拌 16h，12000rpm 离心 10min，再用 超纯水和乙醇反复洗涤，去掉表面没有聚合的材料，最后悬浮于乙醇中；（2）制备SiO2@PAM纳米小球将5‑10mL 10mg/ml的SiO2纳米小球分散到由1‑10mL水、5‑30mL乙醇和0.1‑1mL26 wt %氨水组成的混合溶液，室温下搅拌均匀，加入10‑100μL的3‑（异丁烯酰氧）丙基三甲氧基硅烷，回流搅拌7h‑24h，离心洗涤4‑5遍，最后溶于超纯水中，制得SiO2@MPS溶液；取10‑20ml的SiO2@MPS溶液，加入0.10‑0.20g丙烯酰胺，0.05‑0.10g亚甲基双丙烯酰胺，10‑100μL丙烯酸，在通保护气体的情况下，加入30‑60μL的30 wt %的过硫酸铵和20‑40μL的四甲基乙二胺，室温搅拌4‑6h；离心清洗4‑6次，即得羧基功能化的SiO2@PAM纳米小球溶液；(3)SiO2@PAM荧光纳米小球制备氨基改性的荧光染料:取1‑10mg的荧光染料加入到一定量的pH 9~11的缓冲液中，缓慢加入0.2‑15μL的乙二胺，避光搅拌过夜，制得氨基改性的荧光染料；(4)将5‑10mL制备的羧基功能化的SiO2@PAM纳米小球加入到一定量pH 5~7的缓冲液中，加入10倍羧基摩尔量的EDC和NHS，室温活化0.5‑2h后加入1‑10mL的氨基改性的荧光染料，搅拌2‑4h；离心清洗5‑8次，透析一天，即制得SiO2@PAM荧光纳米小球。