[发明专利]检测驴奶中是否含有牛奶的引物、探针组合物及试剂盒

摘要

本发明公开了检测驴奶中是否含有牛奶的引物、探针组合物，包括如SEQ ID NO.1～9所示的引物和探针。本发明还公开了一种检测驴奶中是否含有牛奶的试剂盒，包括如SEQ ID NO.1～9所示的，以及PCR反应所必需的反应原料和试剂。本发明还公开了一种检测驴奶中是否含有牛奶的检测方法，包括以下步骤：取待检测样品，提取DNA，然后利用上述引物、探针组合物或试剂盒对DNA进行PCR扩增，收集荧光信号，根据荧光信号判断待检测样品中是否含有驴奶成分或/和牛奶成分。本发明的检测技术，可有效避免因样本含有PCR抑制物而产生的假阴性结果，具有准确、稳定、操作简单、灵敏度极高、特异性强等优点。

主权项

检测驴奶中是否含有牛奶的引物、探针组合物，其特征在于：包括以下引物和探针，其核苷酸序列如下：(1)引物①驴特异引物：LF：5’‑CGTGAAGAGGCGGGAATAACC‑3’；LR：5’‑ATTATGTATTTTGACTGGTTAGTCTAG‑3’；②牛奶特异引物：NF：5’‑ACTAACCAACCCAAAGAGAATAAATTT‑3’；NR：5’‑GATTTGACTTGTGGGTCTAGTC‑3’；③内参引物：16SF:5’‑ACCGTTACCGAGTCCAGGTG‑3’；16SR:5’‑TTCGGACTCGATCAGAGCAC‑3’；(2)探针：驴奶探针(LP)：5’‑CGAGCGACAAAAAATAATATACAAACCTAACCGCTCG‑3’；牛奶探针(NP)：5’‑CGTCCAGTAACAACAATCTCCATGAGTTGGTAGTGGACG‑3’；内参探针(16sP)：5’‑CGACGGTCCTTTCTAATGTTGCGTCG‑3’；其中，探针的5’端用荧光素修饰：驴奶探针(LP)用FAM标记，牛奶探针(NP)用JOE标记，内参探针(IRCP)用CY5标记；所有探针的3’端的淬灭基团用Dabcyl修饰。