[发明专利]一种高通量筛选具有Nrf2激活活性的化合物的方法在审
| 申请号： | 201510438707.5 | 申请日： | 2015-07-23 |
| 公开（公告）号： | CN105087644A | 公开（公告）日： | 2015-11-25 |
| 发明（设计）人： | 蒋凡;叶青;仵霄 | 申请（专利权）人： | 山东大学 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N5/10;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人： | 曹丽;张勇 |
| 地址： | 250061 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种高通量筛选具有Nrf2激活活性的化合物的方法，包括以下步骤：(1)构建含有3个Nrf2结合位点的报告基因；(2)将报告基因插入到质粒当中，得到报告基因质粒；(3)用大肠杆菌将报告基因质粒扩增并提纯质粒；(4)用提纯的报告基因质粒转染HeLa细胞，筛选稳定表达细胞株用于未知化合物的筛选。本发明使现有技术中的检测Nrf2激活作用的方法能够适应新药前期开发阶段高通量筛选的需求。原有方法完成一次检测通常需要半天到两天不等，而一次实验所能检测的样品数量不超过十几个。本发明的方法，每个96孔板可检测至少10个样品，完成一个96孔板检测的时间少于30分钟。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 通量 筛选 具有 nrf2 激活 活性 化合物 方法 | ||
【主权项】：
一种高通量筛选具有Nrf2激活活性的化合物的方法，其特征是，步骤如下：(1)构建含有3个Nrf2结合位点的报告基因；(2)将报告基因插入到质粒当中，得到报告基因质粒；(3)用大肠杆菌将报告基因质粒扩增并提纯质粒；(4)用提纯的报告基因质粒转染HeLa细胞，筛选稳定表达细胞株用于未知化合物的筛选。
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